NEFELOMETRIJA: OD ČEGA SE SASTOJI I PRIMJENE - KEMIJA - 2025

Nefelometrijskim uključuje mjerenje zračenja uzrokovana čestice (u otopini ili suspenziji), a mjerenje snagu zračenja raspršenog pod kutem prema smjeru zračenja.

Kada je suspendirana čestica pogodjena snopom svjetlosti, pojavljuje se dio svjetlosti koji se reflektira, drugi se dio apsorbira, drugi se odbija i drugi se prenosi. To je razlog zašto kada svjetlost udari u proziran medij u kojem postoji suspenzija krutih čestica, suspenzija postaje mutna.

Što je nefelometrija?

Disperzija zračenja česticama u otopini

U trenutku kada svjetlosni snop pogodi čestice suspendirane tvari, smjer širenja zrake mijenja svoj smjer. Taj učinak ovisi o sljedećem:

1.Dimenzije čestice (veličina i oblik).

2. Karakteristike suspenzije (koncentracije).

3.Duljina vala i intenzitet svjetla.

4.Svjetla udaljenost nesretno.

5. Kut otkrivanja.

6. Indeks loma medija.

nefelometrom

Nefelometar je instrument koji se koristi za mjerenje suspendiranih čestica u tekućem uzorku ili u plinu. Tako fotoćelija postavljena pod kutom od 90 ° prema izvoru svjetlosti otkriva zračenje čestica prisutnih u suspenziji.

Isto tako, svjetlost koju reflektiraju čestice prema fotoćeliji ovisi o gustoći čestica. Dijagram 1 prikazuje osnovne komponente koje čine neflometar:

Slika 1. Osnovne komponente nefelometra.

DO.

U nefelometriji je od presudne važnosti izvor zračenja s velikim svjetlosnim snagama. Postoje različite vrste, u rasponu od ksenonskih svjetiljki i živinskih žarulja, halogenih žarulja iz volframa, laserskog zračenja.

B.

Ovaj sustav smješten je između izvora zračenja i kivete, tako da se na taj način na kiveti izbjegava zračenje različitih valnih duljina u usporedbi s željenim zračenjem.

U suprotnom, reakcije fluorescencije ili grijanja u otopini uzrokovat će odstupanja od mjerenja.

C.

To je uglavnom prizmatični ili cilindrični spremnik, a može imati različite veličine. U tome je rješenje koje se proučava.

D.

Detektor se nalazi na određenoj udaljenosti (obično vrlo blizu kivete) i zadužen je za otkrivanje zračenja raspršenog česticama u suspenziji.

I.

Obično se radi o elektroničkom stroju koji prima, pretvara i obrađuje podatke, što su u ovom slučaju mjerenja dobivena iz provedene studije.

odstupanja

Svako mjerenje podliježe postotku pogreške, koju uglavnom daju:

Kontaminirane stanice: u stanicama, bilo koje sredstvo koje se nalazi izvan ispitivane otopine, bilo unutar ili izvan ćelije, smanjuje zračenje svjetlosti na putu ka detektoru (neispravne stanice, prašina prianja na stijenke ćelije).

Smetnje: prisutnost mikrobiološkog onečišćenja ili zamućenja raspršuje zračenje energije, povećavajući intenzitet disperzije.

Fluorescentni spojevi: to su oni spojevi koji, kada su pobuđeni incidentnim zračenjem, uzrokuju pogrešna očitanja i velike gustoće rasipanja.

Skladištenje reagensa: Neodgovarajuća temperatura sustava može prouzrokovati nepovoljne uvjete ispitivanja i može dovesti do prisutnosti mutnih ili istaloženih reagensa.

Fluktuacije električne snage: da bi se spriječilo da slučajno zračenje nije izvor pogreške, za jednoliko zračenje preporučuju se stabilizatori napona.

Mjeriteljske karakteristike

Budući da je snaga zračenja otkrivenog zračenja izravno proporcionalna masnoj koncentraciji čestica, nefelometrijske studije u teoriji imaju veću metrološku osjetljivost u odnosu na druge slične metode (poput turbidimetrije).

Nadalje, ova tehnika zahtijeva razrijeđene otopine. To omogućava da se minimiziraju i fenomeni apsorpcije i refleksije.

Prijave

Nefelometrijske studije zauzimaju vrlo važno mjesto u kliničkim laboratorijima. Primjene variraju od određivanja imunoglobulina i proteina akutne faze, komplementa i koagulacije.

Otkrivanje imunog kompleksa

Kada biološki uzorak sadrži antigen koji vas zanima, on se miješa (u puferskoj otopini) sa antitijelom kako bi se stvorio imunološki kompleks.

Nefelometrija mjeri količinu svjetlosti koja se raspršuje reakcijom antigen-antitijelo (Ag-Ac) i na taj se način otkrivaju imuni kompleksi.

Ova studija može se provesti na dvije metode:

Nefelometrija krajnje točke:

Ova se tehnika može upotrijebiti za analizu krajnje točke u kojoj se antitijelo ispitivanog biološkog uzorka inkubira dvadeset i četiri sata.

Ag-Ac kompleks mjeri se nefelometrom, a količina raspršene svjetlosti uspoređuje se s istim mjerenjima koja su izvršena prije nego što je kompleks nastao.

Kinetička nefelometrija

U ovoj se metodi kontinuirano prati brzina stvaranja kompleksa. Brzina reakcije ovisi o koncentraciji antigena u uzorku. Ovdje se mjerenja uzimaju kao funkcija vremena, pa se prvo mjerenje vrši u vremenu "nula" (t = 0).

Kinetička nefelometrija je najčešće korištena tehnika, budući da se istraživanje može izvesti za 1 sat, u odnosu na dugo vremensko razdoblje metode krajnje točke. Omjer disperzije mjeri se neposredno nakon dodavanja reagensa.

Stoga, sve dok je reagens konstantan, smatra se da je prisutna količina antigena proporcionalna brzini promjene.

Ostale aplikacije

Nefelometrija se općenito koristi u analizi kemijske kvalitete vode, za određivanje bistrine i za kontrolu njezinih procesa obrade.

Također se koristi za mjerenje onečišćenja zraka u kojem je koncentracija čestica određena iz disperzije koju stvaraju u upadnom svjetlu.

Reference

1. Britannica, E. (drugo). Nefelometrija i turbidimetrija. Oporavak od britannica.com
2. Al-Saleh, M. (nd). Turbidimetrija i nefelometrija. Preuzeto s pdfs.semanticscholar.org
3. Bangs Laboratories, Inc. (nd). Oporavak s technochemical.com
4. Morais, IV (2006). Analiza turbidimetrijske i nefelometrijske struje. Dobiveno iz repozitorija.ucp.p
5. Sasson, S. (2014). Načela nefelometrije i turbidimetrije. Oporavak od notesonimmunology.files.wordpress.com
6. Stanley, J. (2002). Osnove imunologije i serologije. Albany, NY: Thompson učenje. Dobiveno iz books.google.co.ve
7. Wikipedia. (SF). Nefelometrija (lijek). Oporavilo s en.wikipedia.org