MIKROSKOP TAMNOG POLJA: KARAKTERISTIKE, DIJELOVI, FUNKCIJE - BIOLOGIJA - 2026

Tamno polje mikroskop je poseban optički instrument u određenim laboratorijima. To je rezultat modifikacije napravljene na svjetlosnoj mikroskopiji. Darkfield mikroskopija može se izvršiti trans-osvjetljenjem ili epi-osvjetljenjem.

Prvi se temelji na blokiranju svjetlosnih zraka koje direktno dopiru do kondenzatora, upotrebom uređaja koji interveniraju prije nego što zrake svjetlosti dođu do kondenzatora.

Mikroskop tamnog polja / Treponemi koji se vide u mikroskopima tamnog polja. Izvor: Dietzel65 / Judith Miklossy, Sandor Kasas, Anne D Zurn, Sherman McCall, Sheng Yu i Patrick L McGeer

Tamno polje s propuštenom svjetlošću omogućuje isticanje građevina uz mogućnost promatranja izuzetno tankih čestica. Strukture se vide s određenom lomnošću ili svjetlošću na tamnoj pozadini.

Dok se efekt epi-osvjetljenja postiže pri padu ili kosoj svjetlosti. U tom slučaju, mikroskop mora biti opremljen posebnim filtrom u obliku polumjeseca.

Uz incidentnu rasvjetu, promatrane strukture karakteriziraju vizualni efekt u velikom reljefu. Ovo svojstvo omogućuje isticanje rubova suspendiranih čestica.

Za razliku od svijetlosne mikroskopije, mikroskopska mikroskopija je posebno korisna za vizualizaciju freski koje sadrže suspendirane čestice, bez ikakvih vrsta bojenja.

Međutim, ima nekoliko nedostataka, uključujući i to što se ne mogu koristiti za suhe pripravke ili obojene pripravke. Nema dobru rezoluciju. Osim toga, kako bi se osigurala dobra slika, brojčani otvor ciljeva ne može biti veći od kondenzatora.

karakteristike

Sastav mikroskopa tamnog polja predstavlja važne modifikacije u odnosu na svijetlo polje, jer su osnove mikroskopije suprotne.

Dok su u svijetlom polju svjetlosne zrake koncentrirane tako da prolaze izravno kroz uzorak, u tamnom polju zrake se raspršuju tako da samo ukošene zrake dopiru do uzorka. Zatim se istim uzorkom raspršuju, prenoseći sliku prema cilju.

Ako biste pokušali fokusirati dijapozitiv bez uzorka, primijetio bi se tamni krug, jer bez uzorka nema što rasipati svjetlost prema cilju.

Za postizanje željenog učinka u vizualnom polju potrebno je koristiti posebne kondenzatore, kao i dijafragme koje pomažu u kontroli svjetlosnih zraka.

U mračnom vidnom polju elementi ili čestice suspenzije izgledaju svijetlo i lomljivo, dok je ostatak polja mračan, što čini savršen kontrast.

Ako se koristi koso ili udarno svjetlo, na promatranim građevinama dobiva se rubni efekt s velikim reljefom.

Dijelovi mikroskopa tamnog polja

Izvor: amazon.com

-Mehanički sustav

Cijev

To je uređaj kroz koji slika odražena i povećana objektivno putuje dok ne dođe do okulara ili okulara.

Promiješati

Podrška je tamo gdje se nalaze različiti ciljevi. Ciljevi nisu fiksni, mogu se ukloniti. Revolver se može okretati na takav način da se cilj može mijenjati kada operater treba.

Makro vijak

Ovaj vijak koristi se za fokusiranje uzorka, pomiče se naprijed ili natrag kako bi se uzorak pomicao bliže ili dalje od cilja, a pokret je groteskan.

Mikrometarski vijak

Mikrometrski vijak pomiče se naprijed ili natrag kako bi se uzorak pomaknuo bliže ili dalje od cilja. Mikrometrijski vijak koristi se za vrlo fine ili osjetljive pokrete, gotovo neprimetne. Ona je ta koja postiže krajnji fokus.

ploča tiskalica

To je oslonac na kojem će se uzorak odmarati na toboganu. Ima središnji otvor kroz koji prolaze svjetlosni zraci. Kad se makro i mikrometarski vijci premještaju, stupanj ide gore ili dolje, ovisno o kretanju vijka.

Automobil

Prijevoz omogućuje pomicanje cijelog uzorka s ciljem. Dopušteni pokreti su naprijed-natrag i obrnuto, te s lijeva na desno i obrnuto.

Držeći pincete

Smješteni su na pozornici, izrađeni su od metala i predviđeni su za držanje klizača kako bi se spriječilo da se tijekom promatranja kotrlja. Važno je da uzorak ostane fiksan dok se promatra. Pričvršćivači su točno veličine za primanje klizača.

Ruka ili ručka

Ruka spaja cijev s bazom. To je mjesto na kojem se mora držati mikroskop kad će se pomicati s jedne na drugu stranu. Jednom rukom hvata se ruka, a drugom rukom.

Baza ili stopalo

Kao što mu ime govori, to je baza ili oslonac mikroskopa. Zahvaljujući bazi, mikroskop je u stanju ostati fiksan i stabilan na ravnoj površini.

-Optički sustav

ciljevi

Cilindričnog su oblika. Na dnu imaju leće koje uvećavaju sliku koja dolazi iz uzorka. Ciljevi mogu biti različitog uvećanja. Primjer: 4,5X (povećalo), 10X, 40X i 100X (uranjanje cilj).

Potopni cilj je tako nazvan jer zahtijeva stavljanje nekoliko kapi ulja između cilja i uzorka. Ostale se nazivaju suhe mete.

Ciljevi su ispisani s karakteristikama koje imaju.

Primjer: proizvođačka marka, korekcija zakrivljenosti polja, korekcija aberacije, povećavanje, brojčani otvor, posebna optička svojstva, uranjanje, duljina cijevi, žarišna duljina, debljina pokrova i kodni prsten boja.

Leće imaju prednju leću koja se nalazi pri dnu i stražnju leću na vrhu.

okular

Stari mikroskopi su monokularni, odnosno imaju samo jedan okular, a moderni mikroskopi dvogled, odnosno imaju dva okulara.

Oči su cilindričnog i šupljeg oblika. Oni unutar imaju konvergirajuće leće koje proširuju virtualnu sliku koju je stvorio objektiv.

Okular se pridružuje cijevi. Ovo posljednje omogućava da slika prenesena objektivom dođe do okulara, što će je ponovo povećati.

Okular u svom gornjem dijelu sadrži leću nazvanu okular, a u donjem dijelu se nalazi leća koja se naziva sakupljač.

Također ima dijafragmu i ovisno o mjestu gdje se nalazi imat će naziv. Oni koji se nalaze između obje leće nazivaju se Huygens okular, a ako se nalaze nakon 2 leće to se zove Ramsden okular. Iako postoje mnogi drugi.

Uvećanje okulara kreće se između 5X, 10X, 15X ili 20X, ovisno o mikroskopu.

Putem okulara ili okulara operater može pregledati uzorak. Neki modeli dolaze s pomičnim prstenom na lijevom okularu i omogućavaju podešavanje slike. Ovaj podesivi prsten naziva se dioptrijskim prstenom.

-Svjetlosni sustav

svjetiljka

Izvor je osvjetljenja i nalazi se na dnu mikroskopa. Svjetlost je halogena i emitira se odozdo prema gore. Općenito, svjetiljka koju imaju mikroskopi je 12 V.

Dijafragma

Dijafragma mikroskopa tamnog polja nedostaje iris; u ovom slučaju to sprečava da zrake koje dolaze iz svjetiljke direktno dođu do uzorka, samo će ukošene zrake dodirnuti uzorak. One grede koje su raštrkane strukturama prisutnima u uzorku su one koje će proći cilj.

To objašnjava zašto strukture izgledaju svijetle i svjetlucave u tamnom polju.

Kondenzator

Kondenzator mikroskopa tamnog polja razlikuje se od svijetlog polja.

Postoje dvije vrste: refrakcijski kondenzatori i reflektorski kondenzatori. Potonji je zauzvrat podijeljen u dvije kategorije: paraboloide i kardioide.

Refrakcijski kondenzatori

Ova vrsta kondenzatora ima disk koji je smješten unutar refrakcije svjetlosnih zraka, može se nalaziti iznad prednje leće ili na stražnjoj strani.

Kondenzator ove vrste vrlo je jednostavno improvizirati, jer je dovoljno da ispred prednje leće kondenzatora stavite disk izrađen od crnog kartona koji je manji od leće (dijafragme).

Mikroskop sa svijetlim poljem može se pretvoriti u mikroskop tamnog polja pomoću ovog savjeta.

Kondenzatori refleksije

Oni su ti koji koriste stereoskopske mikroskope. Postoje dvije vrste: paraboloidi i kardioidi.

• Paraboloidi: imaju vrstu zakrivljenosti koja se naziva paraboloidi zbog sličnosti s parabolom. Ova vrsta kondenzatora široko se koristi u istraživanju sifilisa, jer omogućuje promatranje Treponema.
• Kardioid: zakrivljenost kondenzatora slična je srcu, otuda i naziv "kardioid", istoimeni kondenzator. Ima dijafragmu koja je podesiva.

Značajke

-Koristi se za ispitivanje prisutnosti Treponema pallidum u kliničkim uzorcima.

- Korisno je promatrati i Borrelias i Leptospiras.

-Idealno je za promatranje in vivo ponašanja stanica ili mikroorganizama, sve dok nije potrebno detaljiti specifične strukture.

-Idealno je istaknuti kapsulu ili zid mikroorganizama.

Prednost

-Merozni poljski mikroskopi sa refraktivnim kondenzatorom su jeftiniji.

-Koristi se vrlo korisno u 40X uvećanju.

-Oni su idealni za promatranje uzoraka koji imaju indeks loma sličan mediju u kojem su pronađeni. Na primjer, stanice u kulturi, kvascima ili pokretne bakterije, poput spiroheta (Borrelias, Leptospiras i Treponemas).

-Celija se može promatrati in vivo, što omogućava procjenu njezinog ponašanja. Na primjer, Brownovo kretanje, kretanje flagela, kretanje emisijom pseudopoda, proces mitotičke podjele, izbacivanje ličinki, pupoljka kvasca, fagocitoza, među ostalim.

-Omogućuje isticanje rubova struktura, na primjer kapsule i stanične stijenke.

-Moguće je analizirati razdvojene čestice.

- Upotreba boja nije potrebna.

Nedostaci

-Posebno treba paziti pri postavljanju preparata, jer ako su pregusti, neće se dobro promatrati.

- Rezolucija slika je niska.

- Mikroskopi iz tamnih polja koji koriste refrakcijske kondenzatore imaju vrlo nizak postotak svjetlosti.

-Za poboljšanje kvalitete slike pomoću uronjenog cilja (100X) potrebno je smanjiti brojčani otvor blende i na taj način povećati kvalitetu osvjetljujućeg konusa. Za to je neophodno ugraditi dodatnu dijafragmu koja može regulirati brojčani otvor otvora.

- Ne možete vizualizirati suhe pripravke ili obojene pripravke, osim ako su vitalne boje.

-Ne dopušta vizualizaciju određenih struktura, posebno unutarnjih.

- Mikroskopi u tamnim poljima su skuplji.

Reference

1. "Mikroskop tamnog polja." Wikipedia, Slobodna enciklopedija. 26. kolovoza 2018., 00:18 UTC 30 lipnja 2019, 01:06
2. Agudelo P, Restrepo M, Moreno N. Dijagnoza leptospiroze iz uzoraka krvi i kulture promatranjem pod mikroskopom tamnog polja. Biomedicinski. 2008. godine; 28 (1): 7-9 Dostupno s: scielo.org
3. Rodríguez F. Vrste optičkih mikroskopa. Blog kliničkog i biomedicinskog laboratorija. Dostupno na: franrzmn.com
4. Saradnici Wikipedije. Mikroskopija tamnog polja. Wikipedia, Slobodna enciklopedija. 19. listopada 2018., 00:13 UTC. Dostupno na: wikipedia.org
5. Bhatia M, Umapathy B, Navaneeth B. Procjena mikroskopije na tamnom polju, kulture i komercijalnih seroloških kompleta u dijagnozi leptospiroze. Indijski J Med Microbiol. 2015 33 (3): 416-21. Dostupno na: nlm.nih.gov