STUART MEDIJ: TEMELJ, PRIPREMA I UPOTREBA - BIOLOGIJA - 2025

Medij Stuart je polukruti agar ili juhe bez hranjivih tvari, koji se koristi za transport bioloških uzoraka. Njegova je svrha održati sojeve prisutne u uzorku održivim neko vrijeme, ali bez povećanja mikrobne populacije.

Stvorili su ga Moffet, Young i Stuart 1948. godine, a kasnije su ga modificirali Toshach i Patsula. Sastoji se od natrijevog glicerofosfata, natrijevog tioglikolata, kalcijevog klorida i agar-agara. Potonji je prisutan u polu-čvrstom mediju i izostaje u tekućini. Neki laboratoriji dodaju metilen plavu boju.

Culturette s prijevozom Stuart. Izvor: Autor: CDC / Dr. Gilda Jones, ljubaznošću: Biblioteka slika javnog zdravlja

Obično se koriste kada nije moguće odmah sijati uzorak. U ovom slučaju, uzorak se stavlja u transportni medij, dok se prenosi u laboratorij koji će obrađivati ​​kulturu.

Na taj je način zajamčeno da prisutni mikroorganizmi ostanu živi dok ih ne cijepe u odgovarajući medij kulture.

U početku je njegova upotreba bila namijenjena transportiranju uretralnih ili vaginalnih uzoraka, gdje se sumnjalo na prisustvo Neisseria gonorrhoeae. Kasnije su shvatili da bi njegova korisnost mogla biti i veća.

Medij Stuart pokazao se vrlo učinkovitim u očuvanju labilnih i brzih mikroorganizama poput Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Corynebacterium diphteriae, Bordetella pertusis, između ostalih. Pored ostalih ne dosadnih mikroorganizama kao što su Enterobacteria.

Stuart medij u osnovi sprječava isušivanje uzorka, održava osmotsku ravnotežu i čuva mikroorganizme na idealnom pH. S druge strane, strateški ovaj medij ne sadrži hranjive tvari i na taj način sprečava razmnožavanje mikroorganizama.

Na tržištu postoje posebni uređaji za prijevoz uzoraka koji sadrže ovo ili drugo prijevozno sredstvo, pod nazivom culturette. Mogu se pripremiti i u laboratoriju.

osnova

Svrha Stuart načina transporta je da uzorci budu što bliži izvornom stanju sve dok se ne obrade.

Natrijev glicerofosfat i kalcijev klorid su puferski sustav koji djeluje održavanjem pH i osmolarnosti.

U međuvremenu, natrijev tioglikolat djeluje kao redukcijsko sredstvo, a u slučaju da sadrži agar, daje mu polučvrstu konzistenciju, kako bi odgodio oksigenaciju medija. Konačno, metilen plava je indikator oksidacije, odnosno otkriva prisutnost kisika.

Polutvrdi medij s redoks indikatorom idealan je za prijevoz uzoraka kod kojih se sumnja na prisutnost anaerobnih bakterija.

Karakteristike prijevoznih sredstava

Sredstvo Stuart, kao i svako prijevozno sredstvo, ispunjava određene karakteristike, uključujući:

-Održava održive mikrobne sojeve prisutne bez umnožavanja.

-Ne sadrži hranjive tvari; Njegovi spojevi usmjereni su na održavanje uzorka hidratiziranog, pod odgovarajućim pH i osmolarnim uvjetima.

-Inhibira autolizat nekih osjetljivih mikroorganizama, kao što je Pneumokok.

-Primjena je privremena, ne smije se predugo produžavati.

priprema

Polutvrdi Stuart medij s redoks indikatorom

Priprema kod kuće

Sastojci

Natrijev glicerofosfat 10 gr

Natrijev tioglikolat 1,0 gr

Kalcijev klorid 0,1 gr

Metilen plava 0,002 gr

Agar-agar 3 gr

Destilirana voda 1 L

Pomiješajte komponente i zagrijavajte dok se potpuno ne otope. Izlijte u epruvete ili posebne tampone. Uvode se u autoklav i steriliziraju na 121 ° C 15 minuta. Ostavite da se cijevi ohlade u vertikalnom položaju (u obliku bloka). Čuvati na sobnoj temperaturi.

Priprema s komercijalnim medijem

U 1 litru destilirane vode odmjeri se 14,1 g medija. Toplina se često trese dok se potpuno ne otopi, može se prokuhati. Ostatak postupka kao što je već opisano.

Dehidrirani medij je krem ​​boje, a pripremljeni bi trebao biti plave boje na svojoj površini. To je zbog prisutnosti metilen plave boje.

PH sredstva mora se prilagoditi na 7,4 ± 0,2

Tekuće modificirani Stuart srednje (domaće)

Sastojci

Natrijev glicerofosfat 10 gr

Natrijev tioglikolat 1 gr

Kalcijev klorid dihidrat 0,1 gr

Destilirana voda 1000 ml

Ima iste sastojke kao polutvrda, ali nema agar, niti metilen plavo. U ovom slučaju, komponente se miješaju bez zagrijavanja i 0,5 ml se distribuira u epruvete dimenzija 16 x 125 mm s vijčanim kapama.

Sterilizira se u autoklavu na 121 ° C 10 minuta. Za uzorkovanje treba upotrebljavati dakronske brise ako je uzorak za PCR ili rajon ako je za kulturu.

Epruvete se čuvaju na sobnoj temperaturi.

Prijave

Komercijalno postoje posebni uređaji za prijevoz uzoraka koji se nazivaju culturette; Ovaj uređaj je izdužena i tanka cijev koja unutar nje ima bris na kraju, a na kraju je segment koji sadrži polutvrdi ili tekući Stuart medij.

Uređaj se otvori i uzorak se uzme brisom. Zatim se vraća u cijev sve dok vrh tampona nije umetnut u polučvrsti transportni medij; Neki donose poliuretansku spužvu impregniranu tekućim Stuart sredstvom, kojom se uzorak čuva kada se održava mokrim.

U slučaju da se sumnja na prisutnost osjetljivih mikroorganizama, za prikupljanje uzorka potrebno je koristiti pamučne briseve s drvenim ugljenom.

Uzorci koji se mogu uzeti brisom ili brisom i preneti u ovom mediju su faringealni eksudati, rektalni bris i razni izlučevine, među kojima su: vaginalni, uretralni, rani, očni, očni i apsces.

Tijekom prijenosa uzorka u transportnom mediju u laboratorij, mora se izbjegavati podvrgavanje ekstremnim uvjetima okoline (previše hladno ili prevruće). Nagle promjene atmosferskog tlaka također bi se trebale izbjegavati.

Vrijeme u kojem je medij sposoban održati mikroorganizam održivim ovisit će o dotičnom soju. Na primjer, za mikroorganizme roda Neisserias i Haemophilus mogu ostati održivi i do 24 sata, ali sojevi poput Salmonella ili Shigella mogu trajati danima, pa čak i tjednima.

Ako se procjenjuje da obrada uzorka može trajati više od 4 dana, poželjno je zamrzavanje uzorka na -70 ° C.

Identifikacija uzorka u prijevoznom sredstvu

Pripremljeno prijevozno sredstvo ili komercijalna kultura moraju imati naljepnicu na kojoj će se nalaziti sljedeće informacije:

Ime i prezime pacijenta: izbjegava zabune uzoraka.

Identifikacijski broj: prikladno je držati narudžbu na poslu.

Izvor za prikupljanje uzoraka: pomaže bakteriologu da odabere odgovarajući medij za kulturu.

Gostujući liječnik: Ponekad je potrebno za moguće konzultacije.

Datum i vrijeme uzimanja uzorka: potrebno je za prihvaćanje ili odbijanje uzorka prema vremenu koje je proteklo između sakupljanja uzorka i prijema u laboratorij.

Ostale informacije koje bi bile korisne u prilogu su:

Pretpostavljena dijagnoza: vodi dodavanje posebnih medija kulture prema sumnjivoj dijagnozi.

Liječenje antibioticima: korisno je biti priloženi antibiogramu.

Sve su ove informacije od vitalnog značaja za osiguravanje pravilne obrade uzoraka.

QA

Da bi se procijenio učinak Stuart medija, poznati sojevi se mogu inokulirati i držati na 25 ° C, poput: Bordetella pertussis ATCC 9340, Haemophilus influenzae ATCC 19418, Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424, Neisseria meningitidis ATCC 13090, Streptococcus pneumoniae ATCC 630.

U svim se slučajevima očekuje oporavak dotičnog mikroorganizma, koji je sačuvan 24 sata.

S druge strane, mogu se upotrijebiti i drugi sojevi poput: Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcus pyogenes ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 i Escherichia coli ATCC 11775.

U svim se slučajevima očekuje obilno oporavak i do 96 sati.

Ograničenja

Neke studije uvjeravaju da se glicerofosfat prisutan u Stuartovom mediju može metabolizirati nekim koloformima, između ostalih gram-negativnim bakterijama, te se stoga umnožiti u ovom mediju.

Taj se rizik povećava što duže obrada uzorka. Isto tako, izloženost Stuart-ove sredine visokim temperaturama tijekom transporta utječe na to.

Reference

1. "Medij transporta (mikrobiologija)." Wikipedia, Slobodna enciklopedija. 13 travanj 2018, 10:36 UTC. 1. travnja 2019. Dostupno na: es.wikipedia.org
2. Microkit Laboratories: Mediji kulture. Stuart prijevoz. Dostupno na: Dostupno na: Medioscultivo.com
3. LabLisan. Stuartova prijevozna sredstva. Dostupno na: lablinsan.cl
4. Znanstveni MDM. Prednosti upotrebe Stuart mikrobiološkog transportnog medija. Dostupno na: mdmcientifica.com
5. Metrix Laboratories. Stuart. 2017. Dostupno na: metrixlab.mx
6. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiološka dijagnoza. 12 ed. Uredništvo Panamericana SA Argentina.
7. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiološka dijagnoza. 5. izd. Uredništvo Panamericana SA Argentina.