KULTURA KRVI: ČEMU SE SLUŽI, OBRAZLOŽENJE, POSTUPAK, REZULTATI - BIOLOGIJA - 2026

Kultura krvi je bakteriološki test koji nastoji otkriti prisutnost mikroorganizama u krvi. Krv je po prirodi sterilna tekućina i stoga se mora čuvati u fiziološkim uvjetima, pa je prisutnost bakterija ili gljivica u krvi uvijek patološka.

Kada se u krvi nađu bakterije ili gljivice, ali razmnožavanje ne premašuje eliminaciju mikroorganizama od strane imunološkog sustava, naziva se bakteremija (za bakterije) ili fungemija (za gljivice); Ali ako se mikroorganizmi u broju nekontrolirano povećavaju, to se zove septikemija.

Boce s krvnom kulturom (žute: dječja aerobioza, zelena: aerobioza odraslih i crvena: anaerobioza odraslih). Izvor: fotografija koju je snimila autorica MSc Marielsa Gil.

Baktermijemija, gememija i septikemija ugrožavaju život pacijenta i zbog toga se moraju odmah liječiti. Zbog toga, kada postoji sumnja na infekciju u krvi, liječnici traže studiju krvne kulture.

Ova bakteriološka analiza omogućuje da postoji postoji li ili ne postoji infekcija u krvi i koji je mikroorganizam uključen. Pored toga, ako je pozitivan, provodi se test osjetljivosti kako bi se znalo koji se antibiotik ili antifungalni lijek može upotrijebiti u liječenju.

Ako je, s druge strane, krvna kultura nakon 24 sata inkubacije negativna, ne treba je odbaciti dok ne bude negativna 240 sati. Na taj se način osigurava da nema mikroorganizama koji sporo rastu.

Da bi krvna kultura bila pouzdana, prilikom uzimanja uzorka moraju se poduzeti ekstremne aseptične mjere, a za povećanje pouzdanosti i osjetljivosti testa potrebno je uzeti najmanje dva uzorka tijekom ili u blizini vrhunca groznice.

Čemu služi?

Krv je sterilna tekućina i kada se u njoj nađu mikroorganizmi to je 100% patološko. Ova situacija predstavlja vrlo osjetljivu kliničku sliku koja ugrožava život pacijenta.

Kultura krvi važan je bakteriološki test kojim se otkriva prisutnost mikroorganizama u krvotoku.

Mikroorganizmi mogu dospjeti u krv na različite načine, a to bi mogle biti ekstravaskularne infekcije poput: upale pluća, intra-abdominalne infekcije, pijelonefritisa, ozbiljnih infekcija kože, mekih tkiva ili artritisa.

Također može biti i intravenski, na primjer, kontaminacija intravenskih ili arterijskih katetera, endokarditis, intravenska ovisnost o lijekovima, primjena kontaminiranih lijekova ili otopina itd.

Otkrivanje i liječenje uzročnika sepse u pravom je vremenu za osiguranje preživljavanja pacijenta.

U tom smislu liječnik treba navesti ostvarenje krvne kulture kad opazi znakove i simptome koji sumnjaju na septikemiju, poput: vrućice (veće od 38 ° C) bez vidljivog infektivnog žarišta ili, naprotiv, hipotermije (<de 36 ° C).

Ostali znakovi mogu biti: zimica, povećana broj bijelih krvnih stanica (> 10 000 stanica / mm ³) ili značajno smanjenje polimorfonuklearnih stanica (<1.000 PMN / mm ³). Kao i iznenadno pogoršanje multiorgana ili gubitak vitalnosti, među ostalim znakovi upozorenja.

Baktermija može biti stalna, prolazna ili isprekidana. To je važno prilikom uzimanja uzorka, jer ga je potrebno uzeti kada postoji veća vjerojatnost da će mikroorganizam cirkulirati.

Zbog toga se preporučuje uzimanje najmanje 2 uzorka na različitim mjestima. Pored toga, idealno je da se uzorak uzme u grozničavim vrhovima ili kada pacijent ima drhtavicu, ekstremnu hipotermiju, znojenje ili tahikardiju.

Međutim, da bi krvna kultura mogla biti zaista koristan alat, uzorak se mora uzeti s velikom pažnjom. Loša manipulacija ili loša asepsija u trenutku uzimanja uzorka može poništiti test i dobiti lažne pozitivne rezultate.

osnova

Studija se sastoji od aseptičkog uzimanja dva ili tri uzorka krvi i stavljanja u posebne boce.

Posebni uređaji za uzgoj uzoraka krvi nazivaju se boce s krvnom kulturom. Oni su klasificirani u:

Prema dobi bolesnika

-Pedijatrijska upotreba

-Za odrasle.

Prema vrsti mikroorganizma

- Boce za aerobne mikroorganizme (aerobne bakterije, fakultativne bakterije i gljivice).

- Boce s kulturom krvi za anaerobne mikroorganizme (stroge anaerobne bakterije).

Neki sadrže tekući medij za kulturu, a neki sadrže čvrsti i tekući medij kulture istovremeno. Oni također postoje s česticama aktivnog ugljena.

Postupak

Preporuke za uzorkovanje

- Uzorak koji treba uzeti visoko obučeno i obučeno osoblje iz područja mikrobiologije.

- Asepsija ili temeljno čišćenje mjesta sakupljanja uzoraka nesumnjivo je najvažniji korak.

- Kao i kod svih uzorkovanja, zdravstveno osoblje mora tijekom postupka u potpunosti poštovati mjere biološke sigurnosti (korištenje rukavica, haljina, naočala, između ostalog).

- Vodite računa da budu na raspolaganju svi potrebni uređaji za uzimanje uzoraka.

- Označite bočice s punim imenom, datumom, brojem medicinskog kartona, vremenom uzimanja uzorka i rednim brojem laboratorija.

- Idealno je uzeti uzorak prije nego što pacijent započne antimikrobnu terapiju. Navedeno je samo u slučaju kada se sumnja na nefunkcionalnost liječenja u tijeku. U ovom slučaju, uzorak treba uzeti prije promjene lijeka, koristeći boce s krvnom kulturom s antibiotskim inhibitorima (čestice aktivnog ugljena).

- Najmanje 2 uzorka moraju se uzeti na različitim anatomskim mjestima, poput desne i lijeve. Kod sumnje na endokarditis preporučuju se 3 uzorka. U svaki će uzorak biti uključene dvije boce (jedna za aerobiozu i jedna za anaerobiozu).

Količina uzorka

Količina uzorka varira ovisno o dobi pacijenta, ali omjer 1: 5 do 1:10 uvijek treba održavati s obzirom na razrjeđivanje krvne / kulturne juhe.

U novorođenčadi preporučena količina uzorka je 1 ml krvi po bočici. Koristi se dječja bočica.

U slučaju dojenčadi između jednog mjeseca i jedne godine, može se povećati na 1,5 ml krvi po bočici. Koristi se dječja bočica.

U djece starijih od 2 godine odgovarajuća količina uzorka je 2,5 ml krvi po bočici. Koristi se dječja bočica.

Od adolescencije se može povećati do volumena krvi između 5 - 10 ml po bočici. Koristi se boca za odrasle.

Konačno, u fazi za odrasle, potrebna količina je 8-10 ml po bočici. Koristi se boca za odrasle.

uzimanje uzorka

- Uzorak krvi može biti venski ili arterijski. Međutim, arterijska krv uzima se samo kad je uzorkovanje vena nemoguće.

- Ne preporučuje se uzimanje uzorka iz centralnog venskog katetera osim ako:

1. Nemoguće je uzeti uzorak periferno (venski ili arterijski).
2. Pacijenti u riziku od krvarenja.
3. Kada liječnik posumnja u bakteremiju zbog kontaminacije središnjeg venskog katetera.
4. Kada se groznica ponovo pojavi nakon febrilnog prestanka od 4 do 5 dana, bez obzira na to je li pacijent na antimikrobnom liječenju ili ne.

Asepsija prije uzorkovanja

- Odaberite anatomska mjesta za uzorkovanje. Općenito se odabiru vene najboljeg kalibra (bazilika ili cefalična vena).

- Prema Centrima za kontrolu bolesti (CDC) u Atlanti (SAD), rukovatelj mora prije uzimanja rukavica oprati ruke s 2% klorheksidina ili 10% povidon-joda prije uzorkovanja.

-Palpalizirajte i pronađite venu koja će se koristiti.

-Rokalno očistite područje uboda, krećući se od središta prema van koristeći klorheksidin sa sapunom ili antiseptičkim sapunom. Isperite sterilnom fiziološkom otopinom.

Nakon toga nanesite antiseptik i ostavite da djeluje. Primjer klorheksidin glukonat 0,5% tijekom 1 minute ili povidon jod 10% tijekom 2 minute. Za potonje, prvo pitajte je li pacijent alergičan na jod. Ako ste alergični, možete zamijeniti 70% alkohola.

Ekstrakcija uzorka

- Stavite tronožac kako biste potaknuli protok krvi i proširili venu.

- Nemojte više dirati mjesto uboda prstom. Ako je to strogo potrebno, prst treba oprati na isti način kao i područje probijanja.

-Umetnite injekcijsku iglu ili vlasište u venu i izvadite potrebnu količinu krvi.

-Ne stavljajte pamuk ili gazu na iglu kada je uklanjate ako nije sterilna.

-Sklonite sigurnosnu brtvu iz boca vrlo pažljivo i bez dodirivanja poklopca. Neki autori preporučuju provesti dezinfekciju poklopca prije inokulacije uzorka.

- Raspodijelite odgovarajuću količinu krvi u bočicama. Ako se uzorak uzme injektorom, potrebna količina se najprije izlije u anaerobnu tikvicu, a zatim u aerobnu tikvicu. Ako se uzimanje vlasišta (leptira) izlijeva na suprotan način.

- Inverzijom dobro promiješajte bočicu s kulturom krvi.

- Promijenite rukavice i ponovite prethodne korake za prikupljanje drugog uzorka.

-Ako je drugi uzorak uzet s drugog mjesta, to se može učiniti odmah, ali ako je s istog mjesta, morate pričekati 30 do 90 minuta između jednog i drugog uzorka.

- Uzorak treba uzeti u laboratorij što je prije moguće, a ako to nije moguće, mora se ostaviti na sobnoj temperaturi do 18 sati.

Kultura

Jednom u laboratoriju, tikvice se inkubiraju na 37 ° C, pod uvjetima svake tikvice, odnosno u aerobiozi odnosno anaerobiozi.

Prema ručnoj metodi, zvonjenje treba započeti u inkubaciji 24 sata, a zatim zvoniti među dnevnom. Prstenovi se izvode na sljedeći način: najprije se dezinficira poklopac boce i umetne se igla sterilnog injektora. Tekućina se ekstrahira iz tikvice i sije u agar krvi i čokoladni agar.

Ako postoji rast, provodi se Gram, subkulture u određenim medijima, biokemijski testovi i antibiogram.

U automatiziranim metodama oprema Bact / Alert emitira alarm kada otkrije da je bočica pozitivna. Na isti način treba ga staviti na agar krvi i čokoladni agar.

Druga metoda koja se sve više razvija je analiza tikvice nakon 6 sati inkubacije pomoću masene spektrometrije. Ova metoda pomogla je povećati osjetljivost i brzinu dijagnoze.

Rezultati

Sve dok je bočica s krvnom kulturom negativna, liječnik koji se bavi liječenjem može se dati preliminarna intermedijska izvješća. Izvještaj pokazuje da je negativan u satima koje je inkubirao. Na primjer, ako ode negativno do četvrtog dana, izvjestit će se na sljedeći način:

Preliminarni rezultat: negativna kultura u 96 sati inkubacije.

Napomena: studija se nastavlja 240 sati.

Ako je krvna kultura pozitivna, liječnik koji se liječi odmah se obavještava i šalje se izvještaj s najmanje gram kolonije. Primjer:

Preliminarni rezultat: u pozitivnoj kulturi u 48 sati inkubacije uočeni su gram negativni bacili i negativna oksidaza. U tijeku je identifikacija i testiranje osjetljivosti.

Ovaj podatak usmjerava liječnika koji započinje empirijsku terapiju prema mogućem mikroorganizmu, dok čeka konačni rezultat laboratorija.

Nakon završetka bakteriološkog ispitivanja, odnosno mikroorganizma je identificiran i antibiogram je dostupan, konačno izvješće treba poslati što je prije moguće.

Posebno treba paziti ako je ciljni organizam Neisseria gonorrhoeae ili Neisseria meningitidis, jer se ove bakterije inhibiraju u prisutnosti visokih koncentracija natrijevog polianetosulfonata (SPS).

Zbog toga ovaj spoj ne smije prelaziti 0,025% u bocama s krvnom kulturom.

S druge strane, ako se uzorak za uzgoj krvi prvi put uzme u epruvetama za usisavače, ove epruvete imaju koncentracije SPS toksične za meningokoke i gonokoke, pa se krv mora prenijeti u roku jednog sata u sustav za gojenje bujona.

Kako znati je li krvna kultura pozitivna ili je kontaminacija

Krvna kultura smatra se kontaminiranom kada postoji rast samo jedne bočice s krvnom kulturom od ukupno uzete krvi. A sumnja na kontaminaciju raste ako je izolirani mikroorganizam uobičajena mikrobiota kože: primjer: negativan Staphylococcus coagulase, Propionibacterium spp, između ostalih.

Međutim, u bolesnika s oslabljenim imunološkim sustavom ne treba zanemariti nijedan mikroorganizam, ali u ovom slučaju se mikroorganizam mora pojaviti u nekoliko uzoraka.

S druge strane, ako je osjetljivost na antibiotike istog mikroorganizma izoliranog u dva različita uzorka ista, infekcija je stvarna.

Drugo obilježje je bakterijsko opterećenje, budući da kontaminirane krvne kulture kasno rastu, dok stvarne infekcije kod neliječenih pacijenata općenito su pozitivne u 14 sati inkubacije, kada mikroorganizam ne smeta.

S druge strane, u bolesnika liječenih antimikrobnim lijekovima potrebno je vremena da naraste jer je opterećenje vrlo malo.

Pojava više mikroorganizama može sugerirati kontaminaciju, ali ako se isti rezultat ponovi u nekoliko snimaka s različitih mjesta, to je stvarno.

Reference

1. "Kultura krvi." Wikipedia, Slobodna enciklopedija. 3. srpnja 2019., 17:28 UTC. 14. srpnja 2019., 19.05 en.wikipedia.org
2. Hervé B. Nove tehnologije u mikrobiološkoj dijagnozi: automatizacija i neke primjene u mikrobiološkoj identifikaciji i ispitivanju osjetljivosti. Ugledna med. Klinika. Broji. 2015 26 (6) 753-763. Dostupno na: reader.elsevier.com
3. Villarroel P. 20. poglavlje: Sepsa i rizik od kardiovaskularnih bolesti. Kardiovaskularno zdravlje. pp. 187-194. Dostupno na: fbbva.es
4. Sánchez R, Rincón B, Cortés C, Fernández E, Peña S, Heras EM Krvne kulture: Što su vam rekli i što činite? bolestan glob. 2012; 11 (26): 146-163. Dostupno na: scielo.isc
5. Pardinas-Llergo M, Alarcón-Sotelo A, Ramírez-Angulo C, Rodríguez-Weber F, Díaz-Greene E. Vjerojatnost uspjeha u dobivanju pozitivne krvne kulture. Med. Interna Mex. 2017; 33 (1): 28-40. Dostupno na: scielo.org