UNAKRSNI TESTOVI: ŠTO SU ONI, TEHNIKA, OBRAZLOŽENJE, FAZE - LIJEK

Crossmatch niz laboratorijskih istraživanja se provode kako bi se utvrdilo jesu li proizvodi od krvi od donatora (uglavnom cijeli krvi i upakirane kuglastih) su kompatibilni s krvlju primatelja.

To je dodatni komplementarni test kompatibilnosti ABO i Rh faktora. Razlog unakrsnog podudaranja je taj što ponekad dvije osobe (donor-primatelj) mogu imati istu ABO i Rh skupinu, ali im je krv još uvijek nespojiva.

Izvor: unsplash.com

Takva nekompatibilnost nastaje zbog prisutnosti antitijela protiv niza proteina crvenih krvnih zrnaca poznatih kao manji antigeni. Ti se antigeni ne rutinski ispituju jer su u krvnoj grupi (ABO) i Rh faktoru.

To je zbog toga što su manji antigeni mnogo rjeđi i imaju varijabilnu ekspresiju kod svakog pojedinca, pa ih je gotovo nemoguće grupirati u kategorije kao što je to učinjeno sa skupinom i Rh faktorom.

Umjesto toga, crvene stanice donora pomiješaju se s bolesnikovim serumom (test velikog podudaranja), a pacijentovim crvenim stanicama s serumom davatelja (test manjeg podudaranja) radi otkrivanja prisutnosti reakcija antigen-antitijelo.

Kada postoje antitijela na manje antigene, bilo u pacijentovom ili davaočevom serumu, test se kaže da je pozitivan, tako da u većini slučajeva ta određena jedinica krvi ne može biti transfuzirana.

ABO grupa

Da biste u potpunosti shvatili o čemu se radi u unakrsnim reakcijama, najprije morate znati osnove krvnih grupa.

U tom je smislu najvažnije znati da se krv može razvrstati u četiri skupine: A, B, AB i O.

Svaka od ovih skupina izražava na površini crvenih krvnih stanica određeni protein (antigen) koji protutijela potencijalnog receptora druge skupine identificira kao strani element.

Najupečatljivija stvar reakcije antigen-antitijelo u podudaranju krvi je ta da prije antitijela nije potrebno prethodno izlaganje. To je poznato kao prirodna antitijela.

Prirodna antitijela

Općenito, za postojanje antitijela u tijelu pojedinca potrebno je da su bijele krvne stanice pojedinca prethodno izložene antigenu.

To znači da u prvom kontaktu stranog antigena i organizma nema protutijela, jer se ona stvaraju kasnije, nakon početnog kontakta. Stoga je nemoguće da imunološki sustav ima antitijela na primjer određenog virusa ako mu nije bio izložen u prošlosti.

Jedina iznimka od gore navedenog su antigeni antigeni. U tim slučajevima osoba ima antitijela protiv antigena koja nemaju u svojim crvenim krvnim stanicama, iako nikada nisu bile u kontaktu s crvenim krvnim stanicama druge osobe. To je poznato kao prirodna antitijela.

Antigeni i antitijela povezani s krvnom skupinom

Krvne grupe određuju se u slučaju ABO sustava prisutnošću specifičnih antigena (A ili B) na membrani crvenih krvnih stanica, a nasuprot tome, protutijela protiv odsutnog antigena na membrani eritrocita.

Dakle, osoba s krvnom grupom A izražava antigen A na površini svojih crvenih krvnih stanica, dok u serumu postoje protutijela protiv B.

Suprotno tome, kod bolesnika iz grupe B nalazi se antigen B, dok su antitijela anti-A.

Sada, pacijenti s AB krvlju imaju i antigene A i B. Stoga, antitijela nema jer bi to uništilo crvene krvne stanice ove osobe.

Sasvim suprotno događa se u grupi O, gdje membrana eritrocita ne sadrži nijedan od dva antigena (ni A ni B), dok u serumu postoje antitijela anti-A i anti-B.

Nespojivost grupe ABO

Iz prethodnog se lako može razlučiti kompatibilnost krvnih grupa ABO, jer se poznavanjem antigena eritrocitne membrane antitijela u serumu automatski prepoznaju. Tako da:

- Krv A kompatibilna je s skupinom A i skupinom O.

- Krvna grupa B kompatibilna je s krvlju B i O.

- Osobe s grupom O mogu primiti samo O krv (budući da imaju anti-A i anti-B protutijela), iako ih krv bez problema primaju sve ostale skupine jer nedostaju antigeni.

- Napokon. oni s krvnom grupom AB mogu primiti krv iz svih ostalih grupa (A, B, O i naravno AB), jer nemaju antitijela protiv bilo kojeg od antigena. Međutim, samo ljudi iz grupe AB mogu primiti krv AB, jer sve ostale skupine imaju antitijela koja bi uništila ta crvena krvna zrnca.

Manji antigeni

Kao i kod ABO skupina, niz proteina se može naći na površini eritrocita koji djeluju kao antigeni na isti način kao i antigeni ABO grupe.

Međutim, ti antigeni nisu prisutni kod svih pojedinaca. Njihova kombinacija je heterogena i prodornost (nivo ekspresije proteina) je promjenjiva, pa je razvrstavanje u skupine poput one koja postoji za ABO i Rh nemoguće. Otuda dobiva svoje ime po "manjim antigenima", poznatim i kao "antigeni niske incidencije".

Iako nisu česte, mogu postojati prirodna antitijela protiv manjih antigena. Među njima najčešći su Lewis, MNS, anti N, Kell, Duffy, anti Fyb i Kidd. Svi su oni odgovorni za vrlo ozbiljne hemolitičke i post-transfuzijske reakcije.

Uz to, može se dogoditi preosjetljivost na manje antigene prethodnim kontaktom, bilo s navedenim antigenim proteinima zbog prethodnih transfuzija, bilo zbog unakrsnog imuniteta.

Križni imunitet

Kaže se da postoji unakrsni imunitet kada su dva antigena iz dva različita izvora (na primjer, crvena krvna stanica i bakterija) vrlo slična, do te mjere da antitijela protiv jednog od tih antigenih proteina također reagiraju s drugim, jer su gotovo identična, Da biste to bolje razumjeli, uzmite prethodni hipotetski primjer (antigeni iz crvenih krvnih stanica i bakterija). Ni u jednom slučaju nema prirodnih antitijela, ali ako je osoba izložena bakterijama, ona će stvoriti antitijela protiv nje.

Takva će antitijela kasnije reagirati protiv crvenih krvnih stanica ako su njegovi antigeni vrlo slični onima u bakterijama koje su inducirale stvaranje antitijela.

Ako se to dogodi, crvene krvne stanice s tim određenim antigenim proteinom ne mogu se dati osobi koja ima antitijela, jer bi došlo do odbacivanja. U tome leži važnost unakrsnih reakcija.

Čemu služi križanje?

Budući da je nemoguće grupirati krv različitih pojedinaca na temelju manjih antigena, jedini način da se utvrdi postoje li antitijela protiv manjih antigena crvenih krvnih stanica druge osobe u krvi jedne osobe je putem unakrsnog podudaranja., U onim slučajevima gdje su prisutna antitijela, pokreće se reakcija hemolize ili aglutinacije, zbog čega se zaključuje da je reakcija bila pozitivna; to jest, postoje antitijela protiv manjih antigena (iako se ne zna točno koji). Inače je test negativan.

osnova

Ukrštanje se temelji na reakciji antigen-antitijelo. Stoga je s njima moguće otkriti postoje li antitijela u serumu primatelja protiv antigena crvenih krvnih stanica davatelja (ili obrnuto), što izaziva reakciju antigen-antitijelo.

Ako nema antitijela, ne pojavljuje se reakcija i test je prijavljen negativan. Naprotiv, ako je reakcija pozitivna (tijekom ispitivanja postoji hemoliza ili aglutinacija), može se zaključiti da su antitijela prisutna.

U tom je smislu važno napomenuti da može postojati antitijela protiv crvenih krvnih stanica kako u donoru tako i u primateljevom serumu. Zbog toga postoje dvije vrste unakrsnih reakcija.

Vrste unakrsnih reakcija

U bolesnikovom serumu mogu postojati antitijela protiv eritrocita donora; ali može se dogoditi i suprotno, to jest antitijela u donorovom serumu protiv pacijentovih crvenih krvnih stanica.

Zato postoje dvije vrste unakrsnog podudaranja:

- Glavni križ.

- Manji križni presjek.

Obje se vrste rutinski izvode u banci krvi prije transfuzije krvnih proizvoda, jer ako je bilo koji od testova pozitivan, postoji visok rizik od transfuzijskih reakcija koje mogu ugroziti život pacijenta.

Glavni križni presjek

Ovaj test procjenjuje sadrži li primateljev serum antitijela na darodove crvene krvne stanice.

Ako se to dogodi, krvni proizvodi se ne mogu dati, jer će velika količina antitijela prisutnih u plazmi pacijenta vrlo brzo uništiti crvena krvna zrnca davatelja, generirajući katastrofalne reakcije u tijelu primatelja u tom procesu. Te su reakcije toliko ozbiljne da mogu biti opasne po život.

Manji križ

U ovom slučaju utvrđuje se postoje li protutijela protiv primatelja crvenih krvnih zrnaca u serumu davatelja.

Ako je to slučaj, antitijela će početi uništavati primateljeve eritrocite. Međutim, s obzirom da je količina antitijela ograničena, reakcija je manje intenzivna; iako je još uvijek opasno.

faze

Glavni i manji crossmatch podijeljeni su u tri faze:

- Fiziološka otopina.

- Termička ili inkubacija.

- Coombs.

U prvoj fazi miješaju se crvene krvne stanice i serum u fiziološkoj otopini. Nakon toga dodaje se albumin, a uzorak se inkubira 30 minuta na 37 ° C da bi se konačno započelo s fazom coombs.

Tehnika

Tehnika unakrsnog podudaranja relativno je jednostavna, jer uključuje dodavanje crvenih krvnih zrnaca donora u bolesnikov serum (glavni crossmatch), kao i eritrocite primatelja u donorski serum (manji crossmatch).

Da bi se u relativno kratkom vremenu izazvala reakcija antigen-antitijelo, mora se slijediti niz standardiziranih koraka. U nastavku su navedeni pojedini koraci sažeti na pojednostavljeni način.

Važno je napomenuti da u sljedećem odjeljku opisuje glavni test kompatibilnosti, iako su koraci isti za test lagane kompatibilnosti, ali razmjenjuju podrijetlo crvenih krvnih zrnaca i seruma.

Faza soli

- Dodajte u epruvetu 2 kapi seruma od primatelja (od davatelja ako je to manji križni uzorak).

- Uzeti uzorak crvenih krvnih zrnaca od davatelja (od primatelja ako je to manji ukrštač).

- Isperite i centrifugirajte crvena krvna zrnca.

- Ponovno korištenje u otopini između 3% i 5%.

- Stavite kap ove otopine u epruvetu koja sadrži primateljev serum.

- Lagano promiješajte.

- Centrifuga.

- Rezultat očitajte na zaslonu.

Toplinska faza

- Dodajte 2 kapi 22% albumina u epruvetu u kojoj je završena faza fiziološke otopine.

- Inkubirajte na 37 ° C 30 minuta.

- Centrifugirajte 15 sekundi.

- Rezultat očitajte na zaslonu.

Coombsova faza

- Uzmite stanice iz epruvete i operite ih fiziološkom otopinom.

- Uklonite supernatant.

- Dodajte dvije kapi Coombsova reagensa.