KROMATOGRAM: ČEMU SLUŽI I VRSTE - KEMIJA - 2026

Kromatogram je dvodimenzionalna grafički zapis dobiven na upijajućim mediju prikazuje odvajanje tvari kromatografijom. Na kromatogramu se vidi vidljivi uzorak, vrhovi ili mrlje, što odražava fizičko razdvajanje komponenata smjese.

Donja slika je kromatogram s tri vrha, A, B i C, od tri komponente uzorka odvojene kromatografijom. Uočeno je da svaki od tri vrha ima različitu visinu i mjesto na vremenskoj osi kromatograma.

Tipični kromatogram. Izvor: Heliagon, iz Wikimedia Commons

Orinatna ili osi Y bilježe podatke o intenzitetu signala (u ovom slučaju millivolts mV). Predstavlja zapis, ovisno o detektoru, o nekom fizičkom svojstvu tvari ili zasebne komponente smjese.

Visina vrha proporcionalna je koncentraciji komponente odvojene od uzorka u optimalnom sustavu. Tako je, na primjer, lako vizualizirati da je komponenta B u većem omjeru od A i C.

Na apscisi ili osi X prikazano je vrijeme zadržavanja komponenata uzorka ili smjese. Vrijeme je koje protekne od injekcije uzorka do zaustavljanja, različito za svaku čistu tvar.

Čemu služi kromatogram?

To je završni zapis cijelog procesa kromatografije. Iz njega se dobivaju parametri koji su od analitičkog interesa. To se može dobiti u obliku elektroničke datoteke, tiskanog histograma ili na procesnom mediju; na papiru, na primjer.

Y os nastaje putem signalnih ili intenzitetnih reaktora detektora, poput spektrofotometra. Ključna je optimalna analiza vremena, karakteristika dobivenih vrhova i mjesta. veličina, mjesto, boja, među ostalim aspektima.

Analize kromatograma uglavnom zahtijevaju uporabu kontrola ili standarda, tvari poznatog identiteta i koncentracije. Analiza ovih kontrola omogućava utvrđivanje usporedbom s karakterističnim uzorcima komponenata ispitivanog uzorka.

Na kromatogramu možete promatrati i analizirati kako je provedeno razdvajanje komponenata smjese. Njegova optimalna studija omogućava identificiranje tvari, dokazivanje njezine čistoće, kvantificiranje količine tvari prisutnih u smjesi, između ostalih aspekata.

Izvađene informacije mogu biti kvalitativne prirode; na primjer, kad su tvari identificirane i određena njihova čistoća. Kvantitativni podaci odnose se na određivanje broja sastojaka u smjesi i koncentracije razdvojenog analita.

Identifikacija tvari

Analizom rezultata kromatograma različite tvari mogu se identificirati usporedbom vremena zadržavanja s poznatim tvarima. Može se promatrati ako ispitivane tvari prijeđu istu udaljenost ako imaju isto vrijeme kao i poznate tvari.

Na primjer, kromatogram može otkriti i identificirati metabolite lijekova poput stimulansa i steroida u urinu sportaša. Važna je podrška u proučavanju i istraživanju nekih metabolita proizvedenih genetskim poremećajima u novorođenčadi.

Hromatogram olakšava otkrivanje halogeniranih ugljikovodika prisutnih u pitkoj vodi, među ostalim tvarima. To je neophodno u laboratorijskoj analizi kontrole kvalitete, jer omogućava otkrivanje i identificiranje onečišćenja prisutnih u različitim proizvodima.

Klasifikacija čistoće tvari

Na kromatogramu možete razlikovati čiste i nečiste tvari. Čista tvar bi proizvela jedan pik na kromatogramu; dok bi nečista tvar stvorila dva ili više vrhova.

Pravilnim prilagođavanjem uvjeta pod kojima se vrši kromatografija dvije tvari mogu se spriječiti da formiraju jedan vrhunac.

Kvantifikacija tvari

Analizom područja vrha kromatograma može se izračunati koncentracija komponenata uzorka.

Stoga je površina vrha proporcionalna količini tvari prisutne u uzorku. Ovi kvantitativni podaci dobivaju se u visoko osjetljivim sustavima, primjerice onima koji nastaju plinskom ili tekućinskom kromatografijom.

vrste

Jedna od klasifikacija kromatograma usko je povezana s različitim vrstama kromatografije, koje stvaraju odgovarajući kromatogram.

Ovisno o uvjetima rada, detektori će, između ostalih aspekata, kromatogram varirati u svom sadržaju i kvaliteti.

Kromatogrami na papiru ili tankom sloju

Kromatogram se može generirati izravno na papiru ili tankom sloju, izravno pokazujući raspodjelu ili raspodjelu komponenata uzorka.

Vrlo je korisno za odvajanje i proučavanje obojenih tvari koje sadrže prirodne pigmente, poput klorofila. Može se podvrgnuti razvojnim procesima u slučaju da tvari nemaju prirodnu boju, a korisno je za kvalitativne studije.

Kromatogrami generirani detektorima

Hromatogram se također može dobiti pomoću detektora koji bilježi odgovor, izlaz ili završni signal kromatografije. Kao što je već spomenuto, ovaj detektor obično je spektrofotometar, maseni spektrometar, automatski sekvence, elektrokemikalije, među ostalim.

Kromatogrami generirani u stupcima, bilo da se radi o plinovima ili tekućinama, kao i onima visoke rezolucije u tankim slojevima, koriste se detektorima.

Ovisno o vrsti detektora, kromatogram se može klasificirati kao diferencijalni ili integralni, ovisno o obliku odgovora detektora.

Diferencijalni kromatogram

Diferencijalni detektor kontinuirano mjeri reakcijski signal s kromatograma, dok integralni detektori kumulativno mjere odgovarajući signal.

Diferencijalni kromatogram je kromatogram dobiven diferencijalnim detektorom. Ti detektori uključuju, na primjer, spektrofotometre i detektore za promjene električne vodljivosti.

Ova vrsta kromatograma pokazala je rezultat odvajanja aniona iz uzorka, otkrivenih neizravnom fotometrijom. Isti rezultati dobiveni su i za ispitivanje iona, na primjer, s konačnom detekcijom kondimetrijom.

Diferencijalni kromatogram. Izvor: Pixabay

Gornji graf prikazuje primjer diferencijalnog kromatograma, dobivenog automatskim DNK sekvenci (deoksiribonukleinska kiselina). Na grafu se jasno vide vrhovi od četiri boje, jedna boja za svaku dušičnu bazu u DNK.

Pomoću računalnog programa olakšava se interpretacija slijeda baza analiziranih DNK, kao i složenijih analita.

Integralni kromatogram

Integralni kromatogram odgovara onome dobivenom pomoću integriranog detektora. Ovaj kromatogram prikazuje izlaz pojedine ispitivane komponente. Ne može se dobiti više vrhova kao u diferencijalu.

U integralnom kromatogramu dobiva se zapis opisan kao korak. Ovaj oblik je dio kromatograma koji odgovara količini jedne tvari koja izlazi iz stupca.

Reference

1. Bhanot, D. (2013). Kako čitati kromatogram? Oporavilo od: lab-training.com
2. Carey, FA (2006). Šesto izdanje organske kemije. Izdavačka kuća Mc Graw Hill
3. Kromatografija danas. (2014). Što je kromatogram? Oporavilo od: kromatografijatoday.com
4. Mathias, J. (2018). Vodič za početnike: Kako protumačiti rezultate masne spektrometrije plinskom kromatografijom. Oporavilo od: inotechlabs.com
5. Španjolsko društvo za kromatografiju i srodne tehnike. (2014). Kromatogram. Oporavak od: secyta.es
6. Wikipedia. (2019). Papirna kromatografija. Oporavilo sa: wikipedia.org