- karakteristike
- priprema
- Prijave
- Određivanje alkalne fosfataze
- Određivanje antigena prostate (PSA)
- Određivanje aktivnosti enzima arginin kinaza ili fosfokinaza
- Toksičnost
- U ljudskom
- Utjecaj na okoliš
- Reference
Timolftalein pH indikator s u znanstvenim imenom: 3,3-bis -izobenzo-furanon -1 (3H), a njegova je kemijska formula C 28 H 30 O 4. Sintetizira se iz ftalnog anhidrida i timola.
Ovaj pH indikator ima vrlo osebujna svojstva, jer je pri ekstremno niskom pH intenzivno crven (pH <0). Nakon toga dolazi do širokog raspona pH gdje je potpuno bezbojan (pH 1 - 9,2), s opsegom okretanja između 9,3 do 10,5, gdje se može prebaciti u plavu, dok je iznad 10,5 plava intenzivan.
Kemijska struktura timolftaleina pri kiselom pH (bezbojnom) i pri alkalnom pH (tamnoplava). Izvor: Dannybalanta /Pxhere.com
Njegove primjene uključuju davanje pokazatelja kisele baze u određenim kemijskim reakcijama. Također se koristi kao kromogen u nekim kolorimetrijskim reakcijama u kojima se procjenjuje enzimska aktivnost. Na primjer, u određivanju alkalne fosfataze.
Što se tiče toksičnosti, manje je štetna od ostalih pokazatelja pH, a Nacionalno udruženje za zaštitu od požara (NFPA) klasificira kao razinu 1 u odnosu na utjecaj na zdravlje; što znači da nije kancerogena niti mutagena.
Također nema specifičnu toksičnost za bilo koji ciljni organ; to jest, predstavlja mali rizik od agresije na zdravlje. Međutim, izravan kontakt s kožom i sluznicom može uzrokovati blagu iritaciju.
S druge strane, u pogledu zapaljivosti klasificirano je kao 1, a po reaktivnosti kao nula.
karakteristike
PH indikator timolftalein u svom čvrstom obliku je bijeli prah, u tečnom stanju je intenzivno crven pri pH manjem od nule, bezbojan je pri pH 1-9,2 i plavi je iznad 10,5. Molarna masa mu je 430,54 g / mol, a talište je (258 ° C), dok se vrelište kreće između 248-252 ° C. Gustoća je 0,92 g / mL pri 25 ° C
Netopljiv je u hladnoj vodi i topiv u etanolu. To nije eksplozivna tvar.
Iz predostrožnosti, tijekom prijevoza, skladištenja i rukovanja treba držati podalje od jakih oksidansa.
priprema
Za volumetrijske analize općenito se koristi pH pokazatelj, timolftalein u koncentraciji od 0,1%. Da biste to učinili, postupite na sljedeći način:
- Odvažite 100 mg timolftaleina i otopite u 100 ml 95% etilnog alkohola.
Može se pripremiti i na sljedeći način:
- Odvažite 100 mg timolftaleina i otopite u 60 ml apsolutnog alkohola i dodajte 40 ml destilirane vode.
- Čuvati na sobnoj temperaturi (15 - 25 ° C). Važno je da skladište bude hladno, prozračeno i bez vlage.
Prijave
Određivanje alkalne fosfataze
U određivanju ovog testa postoji tehnika koja se temelji na hidroliznom djelovanju alkalne fosfataze na timolftalein monofosfat. Ako je prisutna alkalna fosfataza, ona će hidrolizirati timolftalein monofosfat, oslobađajući timoltalein.
Ovo stvara plavu nijansu pri alkalnom pH. Enzimska aktivnost alkalne fosfataze izravno je proporcionalna intenzitetu nastale boje. Apsorbancija se očitava na 590 nm.
Određivanje antigena prostate (PSA)
U tom smislu, Shao F i suradnici 2018. razvili su kolorimetrijsku tehniku u kojoj koriste mezoporozne nanočestice silicijevog dioksida koji hvataju molekule timolftaleina, a koje su snažno vezane prisutnošću fenil-trimetiloksisilana.
Zauzvrat, te nanočestice su obložene polietileniminom (PEI), što pogoduje vezanju sekundarnog anti-PSA antitijela.
S druge strane, uzorak bolesnika imobiliziran je na tanjuru; i kad je prisutni PSA u kontaktu s nanočesticama, on će se vezati za antitijela. Nanočestice koje se ne vežu uklanjaju se.
Nakon toga, timolftalein će se lako otpustiti dodavanjem alkalne otopine koja stvara plavi ton. Stupanj boje izravno je proporcionalan koncentraciji PSA.
Određivanje aktivnosti enzima arginin kinaza ili fosfokinaza
Pomoću pH pokazatelja timolftalein može se odrediti enzimska aktivnost arginin kinaze. Test se temelji na sljedećem:
Enzim arginin kinaza fosfotransferaza koja sudjeluje u stvaranju fosfoarginina, što je otkriveno u sljedećim kemijskim reakcijama:
Izvor: "Arginin kinaza." Wikipedia, Slobodna enciklopedija. 10. srpnja 2018, 13:49 UTC. 20. svibnja 2019., 03:58 wikipedia.org/
Ako se ova reakcija provodi naspram pH pokazatelja timolftalein, moguće je izmjeriti aktivnost enzima. To je moguće prema sljedećem objašnjenju: reakcija se odvija kod alkalnog pH, gdje će timolftalein pokazati svoju plavu boju.
Enzimska aktivnost mjeri se izblijedjavanjem boje koja se odražava smanjenjem apsorpcije na 575 nm, budući da enzim djeluje, protoni (H +) se oslobađaju, što zakiseli medij.
Zbog toga timoftalein gubi boju nakon što se približi zoni okretanja. Ako pH padne ispod 9,2, postaje potpuno bezbojan.
Stoga je intenzitet plave boje obrnuto proporcionalan aktivnosti enzima.
Toksičnost
U ljudskom
Ovaj je spoj manje toksičan od većine pH pokazatelja, jer mu se do sada ne pripisuju kancerogeni ili mutageni učinci. Međutim, nije posve bezopasan: ako dođe u kontakt s kožom i sluznicom, može nanijeti pojavu crvenila na spomenutim područjima.
Također može proizvesti neželjene reakcije ako se slučajno proguta ili udiše.
U slučaju izravnog kontakta s kožom i sluznicom, zahvaćeno područje treba isprati s puno vode najmanje 15 minuta. A ako primijete znakove iritacije, trebali bi otići u najbliži zdravstveni centar.
Zato se prilikom rukovanja preporučuje uporaba sigurnosnih naprava poput haljina, rukavica i sigurnosnih naočala.
Iako imate mali rizik od zapaljivosti, preporučuje se da zbog opreznosti držite podalje od upaljača.
Utjecaj na okoliš
Iako je manje toksičan za ljudsko zdravlje, toksičan je u vodenim sredinama, pa utječe na organizme koji se tamo nalaze. Uz to, ima visoku bioakumulacijsku moć, a dugoročno je moguće da se mogu formirati produkti razgradnje štetni za okoliš.
Zbog toga treba izbjegavati da ovaj proizvod dospije u površinske ili podzemne vode jer bi utjecao na pitku vodu.
U tom smislu, laboratorije koje koriste ovaj pokazatelj moraju svoj otpad odlagati u skladu s propisima koji su na snazi u svakoj zemlji.
Reference
- Pizzani P, Godoy S, León M, Rueda E, Castañeda M, Arias A. Učinak povećanja koncentracije fitinskog fosfora na aktivnost enzima fitaze i alkalne fosfataze u crijevnom epitelu mladih ovaca. Vlč. Cient. (Maracaibo). 2008.18 (1): 59-64. Dostupno na: scielo.org.
- „Timolftalein”. Wikipedia, Slobodna enciklopedija. 22. veljače 2019. godine, 04:40 UTC. 19. svibnja 2019., 22.20, es.wikipedia.org.
- Shao F, Zhang L, Jiao L, Wang X, Miao L, Li H, Zhou F. Analiza imunogorbensa bez prostate, specifičnog antigena prostate pojačan oslobađanjem molekula indikatora pH zarobljenih u nanočesticama mesoporoznog silicija. Analni kem. 2018; 17; 90 (14): 8673-8679.
- Yu Z, Pan J, Zhou HM. Izravni kontinuirani pH-spektrofotometrijski test za aktivnost arginin kinaze. Protein Pept Lett. 2002; 9 (6): 545-52.
- Scharlau. Sigurnosno-tehnički list Thymolphthalein. 2013.Dostupno na: javeriana.edu.co
- Sigurnosno-tehnički list Thymolphthalein. Sigurnosna lista. Nacionalno sveučilište Heredia, Kostarika. Dostupno na: Thymolphthalein% 20 (3).
- "Arginin kinaza." Wikipedia, Slobodna enciklopedija. 10. srpnja 2018, 13:49 UTC. 20. svibnja 2019., 03:58 en.wikipedia.org.