KONGO CRVENA: KARAKTERISTIKE, PRIPREMA I PRIMJENE - BIOLOGIJA - 2026

Kongo crveno je azo boja proteina nastaju vezivanjem diazonij soli i aktivni aromatski prsten. Ova tvar je sposobna apsorbirati elektromagnetsko zračenje u vidljivom spektru, zbog čega ima intenzivnu boju.

Negativno se naplaćuje. Zbog toga, on ima afinitet prema pozitivno nabijenim staničnim komponentama, poput nekih proteinskih tvari. Njegova boja varira ovisno o pH. U tom smislu, ako je medij kiseli (<nego pH3), boja je intenzivno plava. Između pH3 - pH 5 to je fuksija (zona okretanja), a s> pH 5,2 boja je tamno crvena.

Dehidrirana koloidna otopina Congo Red i Congo Red. Izvor: Pixinio.com i Wikipedia.com

Vrlo je svestrana tvar jer ima višestruku upotrebu. Koristi se kao bojilo u tekstilnoj industriji, a koristi se i za stanice i tkanine.

Napraviti i kulturne medije koji mjere enzimsko djelovanje, kao pH indikator, kao kontrolnu tvar u procjeni ispravnog funkcioniranja spektrofotometra, u ispitivanju stvaranja biofilma ili dijagnozi amiloida.

Isto tako, omogućila je razlikovanje bakterijskih i gljivičnih serotipa identificiranjem specifičnih struktura u njihovom zidu (lipopolisaharidi).

Karakteristike Konga crvene boje

Böttiger je ovu supstancu otkrio 1884. To je derivat diazonija koji nastaje bis-diazojevom kiselinom benzidina i naftionske kiseline. Kongo crvena molekula mjeri 21 Armstrong, a molekulska masa je približno 8000 g / mol.

Kongo crveno karakterizira topivost u vodi, a još više u organskim otapalima poput etanola, tvoreći koloidnu otopinu.

Ima afinitet prema celulozi, prema amiloidnom tkivu i prema stanično nabijenim staničnim komponentama.

priprema

Kongo crveni priprema se u različitim koncentracijama, ovisno o tehnici koja se koristi. Većina koristi Kongo crveno u količini od 1%, 2%, 0,1%, među ostalim.

Na primjer, za pripremu 2% kongo crvene boje treba izvagati 2 g boje za dehidriranu hranu i dodati 100 ml destilirane vode. Potom se čuva u ambre boci.

Prijave

Kao bojilo u tekstilnoj industriji

Jedno vrijeme je bila široko korištena u tekstilnoj industriji zbog fiksacije na pamuk, ali trenutno je u upotrebi jer je kancerogena, a također i zbog toga što boja nije stabilna, obojava se trenjem.

Određivanje kapaciteta za stvaranje biofilma

Pokazalo se da je kapacitet mikroorganizama koji stvara biofilm faktor virulencije.

U tom smislu, crvena boja u Kongu koristi se kao metoda za određivanje stvaranja biofilma. Kongo crvena vezuje se za egzopolizaharide prisutne u biofilmu. Međutim, u usporedbi s drugim metodama, najmanje se preporučuje zbog visokih lažnih negativa koji se javljaju.

Metoda koristi kongo crveni agar, a sastoji se od krvi agar kao baza, glukoze (10 g / l) i kongo crvene boje (0,4 g / l). Sojevi koji se ocjenjuju se sjeme u mediju i inkubiraju tokom 24 sata na 37 ° C, te potom inkubiraju 48 sati na sobnoj temperaturi.

Dokazan je pozitivan test ako se primijete kristalne kolonije crne boje i suhog izgleda.

Kontrola kvalitete spektrofotometra

Za procjenu ispunjava li oprema za mjerenje apsorbancije ili transakcija fotometrijskim parametrima utvrđenim međunarodnim propisima, može se koristiti jednostavna tehnika za utvrđivanje da li oprema emitira rezultate unutar raspona prihvatljivosti.

Jedna od tehnika evaluacije je upotreba konga crvene boje, temeljenog na izosbestičkoj točki.

Izosbestična točka je valna duljina na kojoj Kongo crveno emitira istu apsorbanciju neovisno o pH, koncentraciji i temperaturi. Vrijednost apsorpcije je fiksna i može se koristiti kao referentna vrijednost.

Teorijska izosbestička točka kongo crvene boje zna se da je 541 nm. Ako je dobivena vrijednost različita, zna se da oprema ima problema s odmakom valne duljine, a to treba provjeriti specijalizirani tehničar.

Priprema medija u kulturi

Ortiz i dr. Opisati kulturni medij pripremljen kongo crvenim bojom i karboksimetilcelulozom zvanom CMC agar, kako bi se otkrio mikrobni soj celulita; to jest tvornica celuloze (endoglukoneze, egzoglukanaze i ß-glukozidaza).

Ovaj medij ima intenzivnu boju. Boja će se rasipati djelovanjem enzima endoglukanaze koji razbija strukturu karboksimetilceluloze. To ukazuje na pozitivnu reakciju.

Smanjenje viskoznosti i apsorpcije omogućava kvantificiranje aktivnosti enzima. Na primjer, kod sojeva Streptomyces sp.

Identifikacija mikroorganizama

Kongo crveni ima afinitet prema polisaharidnim strukturama određenih sojeva, čime se postiže identifikacija tih mikroorganizama. Među njima su Escherichia coli i Shigella flexneri.

Kongo crvene agar ploče također se koriste za dobivanje karakterističnih kolonija, kao što je slučaj s Azospirillum sp., Koji između ostalog daje grimizno crvene kolonije.

Boje stanica i tkiva

Jedna od najčešćih primjena Konga crvene je njegova korisnost u dijagnozi amiloidoze. Ova se čudna bolest sastoji od izvanstanične nakupljanja abnormalnog proteina u raznim organima. Ovaj abnormalni protein proizvodi se u koštanoj srži i naziva se amiloid.

Kongo crveni ima visoki afinitet prema ovoj tvari. Ovo se svojstvo koristi kako bi se pokazala njegova prisutnost u histološkim dijelovima tkiva. U tu svrhu koristi se Congo Red zajedno s Hematoxylin / Eosinom.

Spajanje amiloidnog tkiva i kongo crvenog odvija se nepolarnim vodikovim vezama, između karboksilnih skupina i amino skupine. Amiloidni protein osigurava karboksilne skupine (COOH), a Kongo aminokiselinu.

Amiloidno tkivo je obojeno u različitim nijansama u rasponu od ružičaste do duboko crvene kada se vidi pod svjetlosnim mikroskopom. U mikroskopima s dvostruko polariziranom svjetlošću ovi se preparati promatraju s patognomonskom jabučno-zelenom svjetlošću.

Odnosno, oni predstavljaju dikroizam, budući da su amiloidna vlakna anizotropna. Ovo opažanje potvrđuje dijagnozu.

Bojenje tkiva s crvenom Kongo kompatibilno je s drugim dijagnostičkim metodama, kao što su imunocitohemijske metode, i čak se može ponovo obojati.

Kao pokazatelj pH

Svojstvo okretanja promjenama pH koristi se tehnikom koja se naziva kromoendoskopija.

Ova tehnika koristi bojila i pH pokazatelje koji omogućuju otkrivanje određenih patologija. Među njima je upotreba kongo crvene boje koja može otkriti rane žarišta karcinoma u želučanoj sluznici, a koristi se kao marker kiselosti.

Tehnika se temelji na činjenici da je Kongo crveni kod kiselog pH crnog. Stoga će se nakon stavljanja otopine Congo crvene na želučanu sluznicu odabrati mjesta na kojima postoji blijedost za uzimanje uzorka za biopsiju, odnosno tamo gdje nema stvaranja kiseline. Ovo upućuje na prisutnost kanceroznog žarišta ili gubitak parietalnih stanica.

Reference

1. "Kongo crveni." Wikipedia, Slobodna enciklopedija. 8. svibnja 2019., 12.13 UTC. 16. svibnja 2019. godine, 04.08, es.wikipedia.org.
2. Ortiz M, Uribe D. Nova metoda za kvantifikaciju aktivnosti endoglukanaze na osnovi celulozno-kongo crvenog kompleksa. Orinoquia. 2011. lipanj; 15 (1): 7-15. Dostupno s: scielo.org.
3. Peña J, Uffo O. Proizvodnja biofilma u genotipovima Staphylococcus aureus izoliranog od goveđeg mastitisa na Kubi. Vlč Salud Anim., 2013. Dec; 35 (3): 189-196. Dostupno na: scielo.s
4. Fich F, Chahuán M, Farías M, Cárdenas C, Abarzúa A, Araya G i sur. Kožne manifestacije sistemske amiloidoze kao dijagnostički ključ: Klinički slučaj. Vlč. Čile. 2012. travanj; 140 (4): 499-502. Dostupno na: scielo.
5. Duymovich C, Acheme R, Sesini S, Mazziotta D. Spektrofotometri i fotokolorimetri Praktični vodič za ažuriranje. Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana 2005, 39 (rujan-prosinac): Dostupno na: redalyc.org
6. Marín J, Díaz J i Solís J. Kromoendoskopija kod infekcije Helicobacter pylori: je li vrijeme reakcije? Rev Esp Enferm Dig 2012; 104 (1): 1-3
7. Fieser L, Fieser M. 1985. Organska kemija. Uredništvo Reverté. Barcelona, ​​Španjolska. Dostupno na: books.google.co.ve
8. Murillo M. Histološke tehnike bojenja tkiva. Sveučilište u Guadalajari, Meksiko. Dostupno na: academia.edu
9. Paillié M. Određivanje celulotskog, ligninolitičkog i amilolitičkog djelovanja Actinobakterija izoliranih iz rizosfernog tla bijele djeteline (Trifolium repens). 2012. Pontificia Universidad Javeriana Prirodoslovno-matematički fakultet Bogota DC Dostupno na: repozitorij.javeriana.edu.co
10. Cárdenas, D, Garrido M, Bonilla R, & Baldani V. Izolacija i identifikacija Azospirillum sp. na gvinejskoj travi (Panicum max. Jacq.) iz doline Cesar. Pašnjaci i krmiva, 2010.; 33 (3): 1-8 Dostupno na: scielo.