TEHNIKA FAUSTA: TEMELJ I MATERIJALI, KORACI, PREDNOSTI, NEDOSTACI - LIJEK - 2025

Faust tehnika je metodologija koja omogućuje koncentraciju nekih jaja i / ili ličinke parazita koji se nalaze u izmetu koje pluta. Koristi se kada su izravni koproparasitološki testovi negativni ili kada želite dobiti čiste uzorke bez detritusa.

Metode koncentracije za koproparasitološke pretrage su tri vrste: flotacijom, sedimentacijom ili metodama koje kombiniraju prethodne dvije. Ove metode povećavaju šanse za pozitivne rezultate.

Analiza stolice.

Faustova metoda sastoji se od miješanja dijela uzorka stolice s tvari gušćom od jaja ili parazita u kojima se koncentriraju. Zbog toga, budući manje gusti, lebde na površini. Supernatantna tekućina se sakuplja i pregledava pod mikroskopom radi identifikacije i kvantifikacije.

Ova metoda se koristi za vizualizaciju jaja helminta. Istodobno, pokazalo se da je vrlo osjetljiva metoda dijagnoze Giardia lamblia, flageliranog protozoana koji je rasprostranjen u cijelom svijetu. Metode flotacije ne preporučuju se jakim parazitskim jajima kao što su trakulje i trematode.

Paraziti su jedna od najrasprostranjenijih crijevnih infekcija u svijetu, posebno u siromašnim zemljama sa lošim sanitarnim mjerama. Iz tog razloga, postojanje osjetljivih metoda prepoznavanja i kvantifikacije ovih parazita vrlo je korisno za dijagnozu i liječenje.

Osnova i materijali

Tehnika se temelji na postojanju različitih specifičnih težina jaja, parazita, cista, ličinki i detritusa, koristeći otopine cink sulfata kao flotacijsku metodu.

Obrazloženje ove tehnike je miješanje uzorka s otopinom cink sulfata koji je veće gustoće od lakših jaja, ličinki ili parazita.

To omogućava taloženje težih elemenata, a lakši plutaju koji se pojavljuju u supernatantu nakon centrifugiranja uzoraka.

materijali

Kontejneri za prikupljanje uzoraka fekalija (Izvor: Bobjgalindo putem Wikimedia Commons)

- Pripremite otopinu cinkovog sulfata gustoće 1,18 ili 1,2 g / ml ako je uzorak prethodno obrađen.

- Pripremite stalak s prethodno označenim epruvetama.

- Imajte centrifugalni stroj.

- Imajte pri ruci dijapozitive i poklopce za mikroskop. Svi moraju biti označeni

- Provjerite je li Lugolovo rješenje dostupno za mrljanje listova.

- Imajte gaze za filtriranje.

- Imajte lijevke i destiliranu vodu.

- Pronađite plastične ili kartonske naljepnice s oznakom.

- Također aplikatori i sterilna drška od 5 mm.

- Upaljač za sterilizaciju ručke.

koraci

Makroskopski i mikroskopski pregled

Za bilo koji pregled stolice, ispitivanje započinje s onim što se naziva "grubim pregledom" uzoraka.

Opisane su konzistencija, boja, prisustvo crijeva, prisutnost sluzi i odrasli paraziti odraslih.

Zatim nastavljamo s "mikroskopskim pregledom" stolice, to ovisi o metodi. Najjednostavnija je metoda izravnog razmazivanja, što je najjednostavnija mikroskopska metoda promatranja parazita.

Fotografija opažanja Gardia lamblia, crijevnog parazita (Izvor: Riddlemaster via Wikimedia Commons)

Postupak uključuje postavljanje male količine uzorka izravno na tobogan. Stavite nekoliko kapi fiziološke otopine koje bi trebale biti slične veličine uzorku. Pomiješajte fiziološku otopinu sa stolicom dok se ne stvori homogena smjesa. Stavite pokrivač i pregledajte pod mikroskopom.

Izvorna tehnika Fausta

Drugi postupak sastoji se od metode Faust float, čija se izvorna verzija sastoji od:

1- Oko dva grama izmeta stavite u prikladnu posudu za tu svrhu.

2- Dodajte 30 ml flotacijske otopine cinkovog sulfata s kojom se emulzija postiže miješanjem otopine s izmetom.

3- Stavite metalni cjedilo u drugi spremnik i prebacite u epruvetu.

4- Dodajte još flotacijske otopine dok se u epruveti ne formira meniskus.

5- Stavite staklenu prekrivačku na menisk. Ostavite da odmara 10 do 15 minuta.

6- Uklonite pokrivač i stavite ga na klizač koji će se pregledati pod mikroskopom.

Faustova tehnika centrifugiranjem

U početku metoda nije koristila centrifugiranje, no sada je uključena kako se postižu bolji rezultati. Tehnika uključuje niz koraka za postizanje ispravne procedure, a to su sljedeći:

1- Izmet se ispere vodom, dobro se pomiješa i filtrira pomoću gaze presavijene u četiri. Uzorak se stavlja u epruvetu.

2- Centrifugirajte i uklonite supernatant (uzorci koji se drže iznad vode). Koraci 1 i 2 ponavljaju se sve dok supernatant ne bude "čist".

3- Fink cinka dodan je filtriranom i centrifugiranom uzorku.

4- Dobro se miješa.

Ponovno centrifugirajte 1 minutu pri 2500 okr / min (okretaja u minuti).

6- Supernatant se dobije sterilnom petljom od oko 5 mm; cijevi se ne smiju tresti.

7- Uzorak prikupljen od supernatanta se stavi na tobogan i kap Lugol se može staviti u boju, pokrivač se stavi i promatra pod mikroskopom.

8- Posude i epruvete su označene.

Prednost

- Elementi korišteni za dijagnozu mogu se vidjeti čistim i bez „detritusa“, to olakšava promatranje lista i skraćuje vrijeme korišteno za dijagnozu.

- U supernatantu se oporavljaju i larve, jajašca i / ili ciste.

- To je metoda vrlo niskih troškova.

- Postupak je vrlo jednostavan i lako se provodi.

- Dijagnoza je brza i točna.

- Zbog važnosti i visoke učestalosti parazitoze u siromašnim zemljama, ove su jeftine i jednostavne metode za upotrebu idealne za dijagnozu i praćenje ovih patologija.

Nedostaci

Gustoća flotacijske otopine stvara kontrakciju ličinki, odnosno smanjuje se i u vrlo kratkom roku može se deformirati. To prisiljava ispitivača da odmah postavi dijagnozu i tretirani uzorci se ne mogu čuvati za buduće pretrage.

Kao i kod svih metoda mikroskopske identifikacije, za postavljanje točnih dijagnoza potrebno je visoko iskusno osoblje.

Brza deformacija elemenata neophodnih za dijagnozu, iako je očigledan nedostatak, može se ispraviti neposrednim mikroskopskim opažanjima.

Reference

1. Ananias, FL (2017). Procjena osjetljivosti Faustove metode i spontana sedimentacija za dijagnozu giardiasis. Kubanski časopis za tropsku medicinu, 68 (2).
2. Bartlett, MS, Harper, K., Smith, N., Verbanac, P., & Smith, JW (1978). Usporedna procjena modificirane flotacije cinkovog sulfata. Časopis za kliničku mikrobiologiju, 7 (6), 524-528.
3. Becker, AC, Kraemer, A., Epe, C., & Strube, C. (2016). Osjetljivost i učinkovitost odabranih koproskopskih metoda-sedimentacija, kombinirane sedimentacije-flotacije cinkovog sulfata i McMaster-ove metode. Parazitološka istraživanja, 115 (7), 2581-2587.
4. Garcia, LS, Arrowood, M., Kokoskin, E., Paltridge, GP, Pillai, DR, Procop, GW,… & Visvesvara, G. (2018). Laboratorijska dijagnoza parazita iz gastrointestinalnog trakta. Pregled kliničke mikrobiologije, 31 (1), e00025-17.
5. Summers, WA (1942). Modifikacija centrifugalne flotacije cinkovog sulfata za oporavak helmintičnih jajašaca u formaliniziranom izmetu. Journal of Parasitology, 28 (4), 345-346.