LAKTOFENOL PLAVA: KARAKTERISTIKE, SASTAV, PRIPREMA, NAMJENE - KEMIJA - 2026

Lactophenol plave ili plavo pamuk pripremljen s jednim boja svojstvima. Koristi se u kliničkim laboratorijima kako bi se uglavnom obojile gljivične strukture poput hifa, klice i spore.

Pomaže u pretpostavljenoj ili preliminarnoj dijagnozi određenih gljivica, međutim, uvijek je preporučljivo pojačati dijagnozu specifičnijim testovima, poput biokemijskih ili seroloških ispitivanja.

Grafički prikaz mrlje od laktofenola, mrlja obojena laktofenol plavim, mikroskopskim pripravkom. Izvor: public Domain Pictures.net/https://www.youtube.com/watch?v=P-kiFFZ7NvU /https://www.youtube.com/watch?v=wSZ77T5L6e8

Laktofenol plavo sastoji se od mliječne kiseline, anilin plave boje, glicerina, fenola i deionizirane vode. Može se pripremiti u laboratoriju ili se može kupiti gotova za upotrebu. Nakon što je pripremljen, spreman je za uporabu, ni u kojem slučaju ga ne smije razrjeđivati, jer će ova akcija dati strašne rezultate.

Koncentracija njegovih sastojaka čini ga idealnim za bojenje gljivičnih struktura, jer fenol eliminira prateću bakterijsku mikrobiotu, dok mliječna kiselina stvara zaštitni film oko strukture gljivica. Konačno, anilin plava boja ima afinitet da se pridržava struktura gljiva.

osnova

Laktofenol plavim postupkom provodi se jednostavno bojenje gljivičnih struktura određene mikološke kulture. Naziva se jednostavnim jer koristi samo jedno bojilo.

Laktofenol plavo, osim bojenja, djeluje i kao pročišćivač uzorka, zahvaljujući zajedničkom djelovanju mliječne kiseline i fenola, osim toga, fenol se ponaša kao mordant i istovremeno sprečava lizu mikroorganizma inhibirajući hidrolizne enzime koji može biti prisutan.

Dok mliječna kiselina čuva morfologiju struktura gljiva.

S druge strane, anilin plava boja ima svojstvo prianjanja ili vezanja na strukture koje sadrže hitin. Strukture su obojene u svijetloplavu boju.

Treba napomenuti da stanična stijenka gljivičnih mikroorganizama, posebno plijesni, sadrži hitin, zbog čega je ova boja idealna za bojenje tih mikroorganizama.

karakteristike

Otopina laktofenola plava je blago zamućena, svijetloplava, jako kisela vodena boja. Ostaje stabilan ako se čuva na temperaturi između 15 ° C i 25 ° C. Bocu treba držati pravilno zatvorenu. Nadražujuće je i korozivno na koži i sluznici.

Sastav

Formula za pripremu jedne litre laktofenol plave boje je sljedeća:

-250 g / L mliječne kiseline

-1,0 g / L anilin plava ili metil plava

-500 g / L glicerina

-250 g / L fenola

-250 ml deionizirane ili destilirane vode.

Fenol se otopi u prethodno zagrijanoj vodi. Mliječna kiselina i glicerin se dodaju i miješaju vrlo dobro. Konačno, anilinsko plavo otapa se. Ponovno se miješa i spreman je za upotrebu.

Porcije za pripremu 80 ml otopine laktofenol plave su:

-20 g kristala fenola

-20 ml mliječne kiseline

-40 ml glicerina ili glicerola

-20 ml destilirane vode.

Koristiti

Koristi se za bojenje gljivičnih struktura i pomoću morfoloških karakteristika promatranih na mikroskopskoj razini kako bi se mogla postaviti pretpostavljena dijagnoza gljivice.

Postupak

Bojenje gljivičnih struktura kultura

- Uzmite čistu kulturu gljive čije se strukture trebaju promatrati.

- Poželjno radite u poklopcu za laminarni protok ili ispod upaljača, koristeći masku i rukavice, jer je potrebno udovoljiti standardima biološke sigurnosti, jer se većina plijesni lako širi u okolišu i stoga predstavlja opasnost za operatera.

- Kap laktofenol plave boje stavi se na slajd.

- Izrežite mali kvadrat kvalitetne ljepljive vrpce i vrlo pažljivo ga lijepite na kraj hladne sterilizirane ručke od platine.

- Platina s drškom približava se površnom dijelu gljivične kolonije i kultura se dodiruje vrlo pažljivo, točno tamo gdje se nalazi ljepljiva traka.

- Zatim se odvodi na tobogan i stavlja točno na kapljicu laktofenol plave vodeći računa da se traka savršeno produži i podmaže s bojom. Platinasta ručka vrlo je osjetljivo uklonjena.

- Još jedna kap laktofenol plave boje stavi se na vrpcu, a na vrhu pokrivač. Ne vršite previše pritiska da ne biste uništili strukture gljiva, jer su one izuzetno krhke. Boja treba ostaviti da djeluje otprilike 3 do 4 minute.

- Nakon tog vremena, pripravak je spreman za promatranje pod mikroskopom u 10X ili 40X uvećanju. Ako je potrebno promatranje 100X, treba koristiti uranjanje.

- Strukture gljiva su, općenito, obojene plavo, s izuzetkom gnojnih gljiva koje će zadržati svoju karakterističnu smeđu boju ove vrste gljiva.

Izravno bojenje biološkog uzorka

Ako je potrebno proučiti izravni biološki uzorak, poput sputuma, gnoja, eksudata, sekreta, između ostalog, za to je potrebno prethodno izvršiti postupak dekontaminacije uzorka. Za to se koristi otopina NaOH.

U slučaju uzoraka dlačica mogu se izravno obojati.

Nekoliko zahvaćenih dlačica (ukupno 10) uzima se iz pretpostavljenih lezija tinea capitis (alopečka područja) i stavlja se na slajd (3 do 4 dlake po klizištu). Nekoliko kapi laktofenol plave boje stavi se na vrh i odmah prekriva pokrivačem.

Hvatajte klizač pincetama i lagano zagrijavajte plamenikom. Da biste to učinili, napravite 3 do 4 brza prolaza kroz plamen. Promatrajte mikroskop na 40X i potražite spore izvan ili unutar dlake (ektotrix ili endotrix). Po potrebi dodajte uranjanje i promatrajte na 100X.

Bojenje germe u identifikaciji

Nakon inkubacije pretpostavljene kulture Candida albicans u ljudskom serumu 2 do 4 sata na 37 ° C, uzme se dio otopine i oboji laktofenol plavo. Priprema se promatra pod mikroskopom na 40X. Prisutna je zametna cijev, a blastospore obojavaju svijetloplavu boju.

Podaci o sigurnosti laktofenola

Nacionalna udruga za zaštitu od požara (NFPA) uspostavlja sigurnosni list za kemijske tvari s obzirom na rizik koji predstavlja u različitim aspektima, a simbolizirani su obojenim rombom i brojem u rasponu od 0- četiri.

Opasnosti po zdravlje identificirane su plavom bojom, zapaljivost crvenom, nestabilnost ili reaktivnost u žutoj boji, a svaka posebna opasnost bijelom bojom.

Zdravlje

Rizik za zdravlje koji predstavlja laktofenol plava prema NFPA je razina 3. To znači da je tvar izuzetno opasna kada se guta ili u izravnom kontaktu s kožom ili sluznicom.

To je vrlo korozivna i nadražujuća tvar.

U kontaktu s kožom i sluznicom izaziva teške opekotine.

Ako ga progutate, može prouzrokovati glavobolju, zbunjenost, letargiju, nesvjesticu, zaustavljanje disanja i čak smrt.

Zapaljivost

Prema NFPA-u, laktofenol plavo ocijenjeno je razinom 1 za zapaljivost. To znači da gori samo ako se zagrijava iznad 94 ° C.

Nestabilnost

Navedeni prema NFPA na razini 0 (nula) za reaktivnost. To znači da nema opasnosti od reaktivnosti, odnosno da je hemijski stabilna tvar.

Posebne opasnosti

Ne nudi dodatne posebne opasnosti.

Reference

1. SAR laboratorij. Laktofenol plava. 2010. Dostupno na: labsar.com.
2. Primijenjeni laboratorij kliničke kemije. Laktofenol plavo. 2015. Dostupno na: cromakit.es
3. Merck Laboratories. Mikroskopija laktofenol plava u otopini. 2017. Dostupno na: Korisnici / Equipo / Downloads
4. Kartica za hitne slučajeve. Laktofenol plava otopina za gljivično bojenje. Universidad Pontificia Javeriana, Bogota, Kolumbija. 2014.Dostupno na: javeriana.edu.co
5. González M, Diamont D, Gutiérrez B. Tehnika bojenja gljivičnih struktura biljnim bojama kao alternativa ne zagađuje. Bioagro, 2011; 23 (1): 65-68. Dostupno na: Redalyc.
6. Laboratorijska Hmedija. Laktofenol pamučno plava. 2017. Dostupno s: himedialabs.com
7. Wanger A, Chavez V, Huang R, Wahed A, Glumac J, Dasgupta A. Biokemijska ispitivanja i tehnike bojenja za mikrobiološku identifikaciju. Science Direct, 2017; 61-73. Dostupno od: Elsevier