BAKTERIOLOŠKA PETLJA: KARAKTERISTIKE, VRSTE, NAMJENE - BIOLOGIJA - 2026

Bakteriološka petlja je radio sredstvo koristi mikrobiologa za sjetvu mikrobnih kultura (gljiva ili bakterija). To je možda instrument koji stručnjaci najviše koriste.

Njegova se upotreba čini jednostavnom, ali u stvarnosti zahtijeva puno treninga. Prije početka sjetve, petlju je potrebno sterilizirati u Bunsenovoj plameniku, a zatim se uzima mikrobni inokulum koji može doći iz tekuće kulture ili čvrste kulture.

Vrste bakterioloških petlji. Izvor: Nije naveden autor čitljiv autor. お や お pretpostavljeno (na temelju tvrdnji o autorskim pravima).

Nakon uzimanja inokuuluma može se odložiti u tekući medij ili sijati u čvrsti medij. Nakon svakog postupka petlja se ponovno sterilizira. Drška je pogodna i za izradu mikrobnih mrlja na toboganu.

Bakteriološka petlja ima mnoga imena, a među njima možemo spomenuti: platinasta petlja ili petlja, petlja za inokulaciju ili sjemenska petlja, međutim njegov je pravi naziv Kohle-ova petlja.

Materijal od kojeg je izrađena ručka općenito je legura nikla, kroma (nikroma) ili platine. Druga vrsta dostupnih na tržištu su plastične jednokratne bakteriološke petlje.

S druge strane, postoji nekoliko vrsta bakterioloških petlji, a svaka ispunjava funkciju unutar zadataka koje provodi mikrobiolog. Izbor ručke ovisit će o tome što treba učiniti.

Na primjer, za izvođenje striatuma iscrpljivanjem radi izoliranja mikroorganizma koristi se platinasta petlja koja završava u zatvorenom prstenu, bez obzira je li kalibrirana ili ne.

Dok je za sijanje uzorka urina, gdje je važno kvantificirati CFU, potrebno koristiti kalibriranu petlju. Isto tako, za inokulaciju biokemijskih ispitivanja koja se trebaju sijati probijanjem ključna je petlja igala. Važno je da rukohvat upravlja obučenim osobljem.

karakteristike

Bakteriološke petlje čine dvije krajnosti. Jedan kraj odgovara ručici ili podlozi, dok je drugi kraj same ručke.

Podnožje ili ručka

Podnožje služi za držanje ručke tijekom rukovanja. Obično je metalni, ali ima toplinski izolator koji sprečava spaljivanje rukovaoca kada se vrh ručke sterilizira na upaljaču. Mjeri otprilike 20 cm, iako može biti i dulja. Ima nit za podešavanje ručke.

ručka

To je funkcionalni kraj, to jest, onaj dio koji dolazi u kontakt s mikroorganizmima i s medijima kulture. Sastoji se od fine žice koja je umetnuta u bazu.

Drška može biti izrađena od nikroma ili platine, zbog čega se ponekad naziva i platinasta drška. Duga je oko 6,5 cm, a ima približno 0,20 mm. Ručka s ručicom može iznositi 26,5 cm. Mjerenja mogu biti različita od proizvođača do proizvođača.

vrste

Postoji nekoliko vrsta bakterioloških petlji i svaka ima određenu upotrebu. Vrste ručki su kako slijedi: kalibrirana ručka u obliku prstena, kalibrirana ručka u obliku prstena, ravna ili igla, ručica s lopaticom, ručica u obliku slova „L“ i ručica s oštrim vrhom.

S druge strane, ručke mogu biti trajne ili jednokratne. Oni za trajnu upotrebu steriliziraju se u upaljaču, za višekratnu upotrebu i vrlo izdržljivi. Dok su jednokratni proizvodi od tvornice sterilni, oni se koriste samo jednom i odbacuju se.

Prijave

Ručka prstena, nije kalibrirana

To je najčešće korištena ručka u mikrobiološkom laboratoriju. Koristi se za uzimanje inokuluma iz mikrobne suspenzije (tekući medij) ili dijela kolonije (kruti medij), kako bi se sadio u drugi medij za kulturu, bilo biokemijski test ili obogaćeniji ili selektivniji medij, ovisno o slučaju. Korisno je i za izradu mikrobnih mrlja na toboganu.

S ovom vrstom petlje, početni inokulum se može prošarati. Također je dizajniran tako da glatko klizi po agaru, bez oštećenja. Naravno, za to je potrebno obučeno osoblje koje se bavi tehnikom sjetve, primjenjujući pravilnu silu i pokrete kako bi napravili dobru strikciju.

Ovom ručkom mogu se izvesti različite tehnike sijanja. Primjerice, kruti mediji u Petrijevim posudama obično se sjeme iscrpljenošću (postoji nekoliko tehnika, vidi video 1).

Ova je tehnika namijenjena dobivanju izoliranih kolonija kako bi se proučavale i identificirale, posebno kada je uzorak polimikroban, odnosno kultura nije čista (sadrži više od jedne vrste mikroorganizama).

Umjesto toga, klinovi se sadi u jednostavan cik-cak kako bi se dobila bakterijska masa, u ovom slučaju nije potrebno izoliranje kolonija.

Ponekad se koriste i za uzimanje određenih uzoraka. Na primjer, Rojas i dr. Upotrijebili su bakteriološku petlju za prikupljanje iscrpljenih uzoraka vaginalnog tkiva od štakora.

Bakteriološka petlja s vrhom prstena, nije kalibrirana. Izvor: Pixinio.com

Ručka u obliku prstena, kalibrirana

Ova ručka, kao što mu ime govori, kalibrirana je za uzimanje određene količine suspenzije mikroba. Koristi se kada je inokulum potrebno u skladu s onim što je standardizirano u struci.

Na primjer, vrlo je česta za sadnju mokraćnih kultura. U tom se slučaju mogu upotrijebiti kalibrirana petlja od 0,01 ml i 0,001 ml.

Treba napomenuti da kalibrirane ručke imaju grešku koja varira o kutu uzimanja uzorka i veličini ušća spremnika.

Ako se petlja od 0,001 ml ubaci vertikalno u spremnik s malim ustima (≤ 7 mm), uzeta količina bit će 50% manja od željene.

To se događa jer što je manji promjer ušća spremnika, to je veća površinska napetost i zato se snage adhezije između (stakla i tekućine) povećavaju. Zbog toga je tekućina na koju ručka uzima manje.

Dok se uzima pod kutom od 45 ° u posudi sa širokim ustima (≥ 22 mm) može sakupiti 150% više od potrebne količine. U tom je slučaju površinska napetost manja, a sile kohezije staklo / plastika smanjene, dok se kohezijska sila tekućina-tekućina povećava.

Zbog gore navedenog, za urinske kulture ponekad se preferiraju druge metode za kvantifikaciju jedinica koje formiraju kolonije.

Ravna ili iglasta ručka

Također se naziva i drška navoja. Koristi se za inokulaciju određenih biokemijskih ispitivanja, posebno onih koja se moraju sijati tehnikom uboda. Primjer, polučvrsti mediji koji su pripremljeni u obliku bloka, kao što su: SIM, MIO i O / F medij.

Uz to, u slučaju MIO i SIM koji procjenjuju pokretljivost, bitno je probijanje provesti iglom petljom, jer se tumačenje pozitivnog pokretljivosti događa kada bakterije rastu prema stranicama početnog inokuluma.

Test inokuliran petljom u obliku petlje može krivotvoriti rezultate (lažno pozitivno). Iz tog razloga, kod ove vrste sjetve mora se paziti da je probijanje jedinstveno i da kad je ukloni izlazi u istom smjeru u kojem je i ušlo.

Još jedan test koji se mora zasaditi iglom iako je pripremljen u obliku klina je Kligler. U ovom se ispitivanju ne preporučuje da kisik prodre duboko u agar, jer je potreban medij siromašan kisikom da bi se dogodile određene kemijske reakcije. Ova ručka također se koristi za dodirivanje određene kolonije u svrhu subkultiviranja.

Drška spatulata

Većina mikroorganizama daje meke kolonije koje se lako leže. Međutim, postoje neki mikrobni uzročnici čije su kolonije tvrde i suhe, na primjer mikobakterije općenito i neke gljivice. U tim je slučajevima korisno koristiti dršku lopatice.

Drška u obliku slova L

Njegova najčešća upotreba je za sajenje gljivičnih kultura, posebno plijesni.

Oštra vrška ručke

Korisno je uzimanje vrlo malih kolonija prisutnih u polimikrobnim kulturama, kako bi se mogli subkultivirati.

Tehnike sjetve

Video 1

Sterilizacija platinske ručke

Ručka mora biti sterilizirana prije i nakon upotrebe. Za sterilizaciju bakteriološke petlje u upaljaču postupite na sljedeći način: ručku treba postaviti na vrh plamena, zauzevši što je moguće vertikalniji položaj tako da se sterilizira od vrha prema gore.

Kad se sitna nit postane svijetlo crvena, može se reći da je sterilna. Da biste ga koristili, hladi se i uzima se odabrani uzorak. (Pogledajte video 2).

Sterilizacija bakteriološke petlje

Video 2

Reference

1. Wikipedija, "Bakteriološka petlja", Slobodna enciklopedija. 23. srpnja 2019., 13.31 UTC. 18. kolovoza 2019., 22:45. Wikipedia.
2. Herrera D, López P, Duque J, Pérez L, Golding R, Hernández C. Kalibrirane metalne ručke za mikrobiologe: Alternativa nacionalnoj proizvodnji. Soc. Dođi. Microhiol. 2010; 30 (1): 37-42. Dostupno na: ve.scielo.org
3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiološka dijagnoza. 12 ed. Uredništvo Panamericana SA Argentina.
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiološka dijagnoza. 5. izd. Uredništvo Panamericana SA Argentina.
5. Rojas A, Pardo-Novoa J, Río R, Gómez-Hurtado M, Limón D, Luna F i sur. Određivanje analgetskog učinka ekstrakta heksana iz cvjetova Eupatorium arsenei u modelu akutne boli kod štakora. Mex. znanost. farma. 2015 46 (1): 64-69. Dostupno na: scielo.org