ANTISTREPTOLIZIN O: KVANTIFIKACIJA, OBRAZLOŽENJE, TEHNIKA, PATOLOGIJE - BIOLOGIJA - 2026

O ASO je Protutijelo odgovor na infekcije uzrokovane bakterijama Streptococcus pyogenes, Streptococcus također poznat kao P-hemolitičke A. Ova skupina ima dva egzotoksine s hemolitička aktivnost na pozive streptolysins „S” i „O”,

Streptolizin S odgovoran je za beta hemolizu koja se javlja u krvnom agaru i, iako je toksičan za određene stanice imunološkog sustava, nije antigen. Dok je streptolizin O, koji je labilan protiv kisika, odgovoran za hemolizu koja se događa ispod krvnog agara i to je antigeno.

Streptococcus pyogenes / Dijagram onoga što se događa u ASTO testu (reakcija aglutinacije). (Antitijela vezana na čestice lateksa koja sadrže specifični antigen). Izvor: Korisnik: Graham Beards / Alejandro Porto

Zbog toga, kada stanice imunološkog sustava uzajamno djeluju sa streptolizinom O, stvara se specifični imunološki odgovor koji stvara aktivaciju limfocita B. Te stanice stvaraju antitijela usmjerena protiv streptolizina O. Stoga se antitijela nazivaju antistreptolizin O.

Streptococcus pyogenes proizvodi razne patologije, među kojima su: tonzilitis, erizipele, impetigo, puerperativna groznica, škrlatna groznica i septikemija. Antitijela protiv streptolizina O pojavljuju se 8 do 30 dana nakon početka infekcije.

Većina tih infekcija vrlo je česta u populaciji, pa je uobičajeno da ljudi imaju antistreptolizin O protutijela u krvi. Niski titri ukazuju na prošlu infekciju ovom bakterijom, ali visok ili porast titraja pokazuje nedavnu ili tekuću infekciju.

Kvantifikacija antistreptolizinskih O protutijela

U laboratoriju se titar anti-streptolizinskog "O" antitijela može izmjeriti serološkim testom. Antistreptolizin O (ASTO) test temelji se na reakciji aglutinacije s lateksom.

To se može učiniti polukvalitetno, izvještavanje ukrštanjem ili titar također se može kvantificirati. Normalno je i neznačajno pronaći vrijednosti do 200 IU / ml ili Todd jedinice / ml. Iznad ove vrijednosti smatra se pozitivnom i klinički značajnom.

Ovaj test ne zahtijeva da pacijent posti. Serum se koristi kao uzorak, odnosno krv bolesnika se uzima i stavlja u epruvetu bez antikoagulansa, a zatim se centrifugira radi dobivanja seruma.

Osnove ASTO tehnike

Ova tehnika koristi lateks čestice kao oslonac za fiksiranje antigena streptolizina O. Apsorbirane čestice antigena reagiraju s pacijentovim serumom. Ako pacijent ima antistreptolizin O antitijelo, ta će se vezati na antigen vezan na česticu lateksa.

Ovo vezanje uzrokuje aglutinaciju koja je makroskopski vidljiva. Intenzitet reakcije izravno je proporcionalan koncentraciji prisutnih antitijela.

Tehnike

- Polu-kvantitativna tehnika

Intenzitet reakcije može se polukvantificirati u križima. Da bi se to postiglo, uzima se serološka reakcijska ploča:

50 ul seruma i 50 ul ASTO reagensa. Dobro promiješajte drvenom čačkalicom i stavite u automatsku mješalicu na 2 minute. Promatrati. Ako automatski rotator nije dostupan, to se mora učiniti ručno.

Tumačenje

Suspenzija bez grudica (ujednačena): negativno

1. + = slaba reakcija

2. ++ = blaga reakcija

3. +++ = umjerena reakcija

4. ++++ = jaka reakcija

Serumi koji su pozitivni s 3 i 4 križeva mogu se kvantificirati.

- Kvantitativna tehnika

Za kvantifikaciju titra, vrše se serijska razrjeđenja 1: 2, 1: 4: 1: 8, 1:16.

Da biste to učinili, postupite na sljedeći način: uzmu se 4 epruvete ili Kahnove epruvete i na njih se stavi 0,5 ml fiziološke fiziološke otopine. Potom se u prvu epruvetu doda 0,5 ml bolesničkog seruma. Dobro se miješa. Ta cijev odgovara razrjeđenju 1: 2.

Nakon toga se 0,5 ml prenese u epruvetu 2 i dobro promiješa. Ova epruveta odgovara razrjeđenju 1: 4 i tako dalje, sve dok se ne postigne željeno razrjeđivanje.

Uzmi 50 ul svakog razrjeđenja i reagira s 50 ul ASTO reagensa na aglutinacijskoj ploči, kako je objašnjeno u polukvantitativnoj tehnici.

Tumačenje

Uzima se u obzir najveće razrjeđenje u kojem se opaža aglutinacija. Izračuni se provode na sljedeći način:

ASTO = obrnuto najveće pozitivno razrjeđivanje x osjetljivost tehnike (konstanta).

Primjer: Pacijent s pozitivnom reakcijom do 1: 8

ASTO = 8 x 200 IU / ml = 1600 IU / ml ili Todd jedinica / ml.

Referentna vrijednost

Normalna odrasla osoba: do 200 IU / ml

Normalna djeca: do 400 IU / ml

preporuke

Preporučuje se postavljanje pozitivne i negativne kontrole s pacijentima kako bi se osiguralo da je reagens u optimalnom stanju. Ako pozitivna kontrola ne aglutinira ili negativna kontrola aglutinira, reagens se ne može koristiti.

Reakcija se mora protumačiti nakon 2 minute, a nakon tog vremena nije valjana ako postoji aglutinacija. To su lažni pozitivni rezultati.

Hiperlipemički serumi ometaju reakciju. Mogu dati lažne pozitivne rezultate.

Izolirana ASTO vrijednost nije od velike pomoći. Moraju ga pratiti simptomi.

Pored toga, preporučljivo je izvršiti najmanje 2 mjerenja ASTO kada se sumnja na reumatsku groznicu ili post-streptokokni glomerulonefritis, kako bi se pokazalo povećanje razine antistreptolizina O i tako potvrdila dijagnoza.

Patologije s visokim antistreptolizinskim O titrima

Antitijela protiv streptolizina povećavaju se nakon što su patili od Streptococcus pyogenes ili infekcije ß-hemolitičkim Streptococcusom grupe A.

Među njima su: akutni faringitis, škrlatna groznica, impetigo, erizipele, puerperalna groznica i septikemija.

Neki pacijenti koji su patili od nedavnih ili ponavljajućih streptokoknih infekcija mogu razviti autoimune bolesti kao posljedicu ili komplikaciju post-streptokokne infekcije, poput akutnog glomerulonefritisa i reumatske groznice.

Post streptokokne autoimune bolesti

Reumatska groznica

To je upalna komplikacija ili posljedica koja se može pojaviti 1 do 5 tjedana nakon streptokokne infekcije. Titri antistreptolizina O značajno se povećavaju 4 do 5 tjedana nakon početka bolesti.

Visoki ASTO titar vodi dijagnozu, ali nije povezan s težinom bolesti, a njegovo smanjenje ne znači poboljšanje.

Antistreptolizin O protutijela međusobno reagiraju protiv kolagena i mišićnih vlakana, utječući između ostalog na određene organe (srce, kožu, zglobove i živčani sustav).

Ova komplikacija ili posljedica pojavljuje se sa srčanom zahvaćenošću, vrućicom, nelagodom, ne-suppurativnim migracijskim poliartritisom, koreijom itd.

Akutni glomerulonefritis

Akutni glomerulonefritis je ne-gnojna posljedica koja nastaje zbog taloženja kompleksa antigen-antitijelo na bazalni membrani glomerula.

Stvaranje i cirkulacija kompleksa antigen-antitijela (ag-ac) generiranih streptokoknim infekcijama mogu dovesti do eksudativnih promjena i upale glomerula, uz proteinuriju i hematuriju.

Ovi ag-ac kompleksi se talože u glomerulu i aktiviraju kaskadu komplementa, što rezultira oštećenjem glomerularnog endotela. Iz tog razloga smatra se autoimunom bolešću, jer imunološki sustav pojedinca oštećuje vlastita tkiva.

Antistreptolizin O protutijela su vrlo visoka, a razine komplementa su niske.

Reference

1. Wiener Laboratories. ASO lateks. 2000. Dostupno na: wiener-lab.com.ar
2. Suradnici na Wikipediji. "Anti-streptolizin O." Wikipedia, Slobodna enciklopedija. Wikipedia, Slobodna enciklopedija, 23. siječnja 2019. Web. 19. srpnja 2019.
3. Kotby A, Habeeb N, Ezz S. Antistreptolizin O titra u zdravlju i bolesti: razine i značaj. Pedijatar Rep. 2012; 4 (1): e8. Dostupno na: ncbi.nlm.nih
4. Sen E, Ramanan A. Kako se koristi antistreptolizin O titra. Arch Dis Child Educ Practice Ed. 2014; 99 (6): 231-8. Dostupno na: ncbi.nlm.nih
5. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiološka dijagnoza. (5. izd.). Argentina, uredništvo Panamericana SA
6. González M, González N. 2011. Priručnik medicinske mikrobiologije. Drugo izdanje, Venezuela: Direkcija za medije i publikacije Sveučilišta u Carabobou.